VERFAHREN ZUR BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPE DURCH AVO SYSTEM

PLASMA ANTIGENS

Plasma (Serum) -Antigene sind spezifische Komplexe von Aminosäuren oder Kohlenhydraten auf der Oberfläche von Blutplasma (Serum) -Proteinmolekülen.

KONZEPT DER BLUTGRUPPE

Die BLUTGRUPPE ist eine Kombination aus normalen immunologischen und genetischen Eigenschaften von Blut, die erblich bestimmt ist und eine biologische Eigenschaft jedes Einzelnen darstellt.

Blutgruppen werden vererbt, bilden sich nach 3-4 Monaten intrauteriner Entwicklung und bleiben während des gesamten Lebens unverändert. Es wird angenommen, dass die Blutgruppe beim Menschen mehrere Dutzend Antigene in verschiedenen Kombinationen enthält. Diese Kombinationen - Blutgruppen - können tatsächlich mehrere Milliarden betragen. Sie sind praktisch nur bei identischen Zwillingen mit demselben Genotyp gleich..

In der praktischen Medizin spiegelt der Begriff "Blutgruppe" in der Regel die Kombination von Erythrozytenantigenen des ABO-Systems und des Rh-Faktors und den entsprechenden Antikörpern im Blutserum wider.

Für jedes bekannte Antigen wurden gleichnamige Antikörper (Anti-A, Anti-B, Anti-Rhesus, Anti-Kell usw.) gefunden. Gruppenantikörper von Blut sind keine so konstante Eigenschaft des menschlichen Körpers wie Antigene. Nur im ABO-Gruppensystem sind Antikörper eine normale angeborene Eigenschaft von Blutplasma. Diese Antikörper (Agglutinine a und b) sind im menschlichen Blutplasma ständig vorhanden..

1. BLUTGRUPPEN VON AVO SYSTEM

Der Begriff "Kompatibilität" bedeutet eine Kombination von Spender- und Empfängerblut für Antigene und Antikörper, die keine immunologischen Wechselwirkungen verursacht.

Abhängig vom Vorhandensein der Agglutinogene A und B in Erythrozyten und im Serum der entsprechenden Agglutinine a und b werden alle Personen in vier Gruppen eingeteilt:

• Gruppe O (I) - Es gibt keine Agglutinogene in Erythrozyten, Agglutinine a und b im Serum.

• Gruppe A (II) - Agglutinogen A in Erythrozyten, Agglutinin B im Serum.

• Gruppe B (III) - Agglutinogen B in Erythrozyten, Agglutinin a im Serum.

• Gruppe AB (IV) - Agglutinogene A und B in Erythrozyten, keine Agglutinine im Serum.

Antigen A ist nicht homogen, es gibt zwei Hauptuntertypen: Dementsprechend hat Gruppe A (II) zwei Untergruppen A (P) und A.2 (II) und die AB (IV) -Gruppe - AB (IV) und A.2B (IV).

Antigen der Gruppe B ist homogener, obwohl seltene Varianten beschrieben wurden. Dies hat jedoch keine signifikante klinische Bedeutung..

Die Blutzugehörigkeit nach dem ABO-System wird anhand der Agglutinationsreaktion bestimmt. Derzeit werden drei Methoden verwendet, um Blutgruppen nach dem ABO-System zu bestimmen:

• gemäß Standard-Isohämagglutinierungsseren,

• gemäß Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten (Kreuzmethode),

• Verwendung monoklonaler Antikörper (Anti-A- und Aiti-B-Tsoliclone).

Während einer Routineuntersuchung bestimmt der Krankenhausarzt die Blutgruppe unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren oder unter Verwendung von Tsoliclonen. Anschließend sendet er das Blut an ein serologisches Labor, um die Gruppe mit einer Kreuzmethode zu überprüfen.

Die Blutgruppe gilt erst dann als bestimmt, wenn das Labor die vom Krankenhausarzt erhaltenen Daten bestätigt hat. Wenn sich die Forschungsergebnisse voneinander unterscheiden, sollten beide Studien wiederholt werden..

Im Notfall (bei Blutungen ist eine dringende Bluttransfusion erforderlich) bestimmt der Krankenhausarzt die Gruppe selbst (im Labor wird eine erneute Überprüfung durchgeführt, jedoch nachträglich)..

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH STANDARD-ISOGEMAGLUTINIERUNGSSERUM

Am häufigsten in der klinischen und Laborpraxis.

Die Essenz des Verfahrens besteht darin, Antigene der Gruppen A und B im getesteten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren nachzuweisen. Wird in einem Raum mit guter Beleuchtung bei einer Temperatur von 15-25 ° C durchgeführt.

a) Notwendige Ausrüstung

• Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen O (I), A (II), B (III) und AB (IV) in zwei verschiedenen Reihen. Das Serum sollte transparent sein und keine Anzeichen von Zerfall aufweisen. Der Einfachheit halber werden Standard-Hämagglutinierungsseren verschiedener Gruppen in einer bestimmten Farbe getönt: O (I) - farblos (grau), A (II) - blau, B (III) - rot, AB (IV) - hellgelb. Es ist zu beachten, dass diese Farben allen Etiketten auf Blutprodukten mit Gruppenzugehörigkeit (Blut, Erythrozytenmasse, Plasma usw.) beigefügt sind..

• Weiße Porzellan- oder Emailplatten oder jede andere Platte mit einer benetzten Oberfläche, gekennzeichnet mit 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

• Isotonische Natriumchloridlösung.

• Nadeln, Pipetten, Glasstäbe (Objektträger).

b) Technik der Reaktion

1. Auf eine Platte (Platte) Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen I, II, III in einem Volumen von 0,1 ml (ein großer Tropfen mit einem Durchmesser von etwa 1 cm) auftragen. Um Fehler zu vermeiden, werden zwei Serenchargen aus jeder Gruppe angewendet. Insgesamt 6 Tropfen.

2. Sechs Tropfen Testblut, ungefähr so ​​groß wie ein Stecknadelkopf, 0,01 ml (kleiner Tropfen), werden nacheinander mit einem trockenen Glasstab an 6 Stellen neben einem Tropfen Standardserum auf eine Platte übertragen (die Menge an Testblut sollte ungefähr zehnmal geringer sein als die Menge an Standardserum ), dann mischen Sie sie vorsichtig mit Glasstäben mit abgerundeten Kanten.

3. Nach dem Mischen wird die Platte regelmäßig geschaukelt..

Die Agglutination beginnt innerhalb der ersten 10 bis 30 Sekunden.

4. In den Tropfen, in denen eine Agglutination aufgetreten ist, einen Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugeben, wonach das Ergebnis der Reaktion bewertet wird.

Bei einer positiven Reaktion, normalerweise innerhalb der ersten 10 bis 30 Sekunden, erscheinen kleine rote Körner (Agglutinate), die aus geklebten roten Blutkörperchen bestehen und mit bloßem Auge sichtbar sind, in der Mischung.

Wenn die Seren aller drei Gruppen positiv sind, bedeutet dies, dass das Testblut beide Agglutinogene - A und B - enthält und zur Gruppe AB (IV) gehört. In solchen Fällen ist es jedoch erforderlich, eine zusätzliche Kontrollstudie des getesteten Blutes mit Standard-Isohämagglutinierungsserum der Gruppe AB (IV) durchzuführen, das keine Agglutinine enthält, um eine unspezifische Agglutinationsreaktion (Kaltagglutination, Pangglutination, Allergie) auszuschließen. Nur das Fehlen einer Agglutination in diesem Tropfen in Gegenwart einer Agglutination in Tropfen, die Standardseren der Gruppen 0 (1), A (II) und B (III) enthalten, ermöglicht es uns, die Reaktion als spezifisch zu betrachten und das untersuchte Blut an Gruppe AB zu verweisen0 (Iv).

Es ist zu beachten, dass in Gegenwart eines schwachen Subtyps von Antigen A im untersuchten Blut die Agglutinationsreaktion mit hämagglutinierenden Seren der Gruppen 0 (1) und B (III) später (nach 3-4 Minuten) beginnt. Um den Subtyp von Antigen A genau zu bestimmen, ist es notwendig, eine zusätzliche Reaktion mit dem sogenannten Anti-A-Reagenz durchzuführen.

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH STANDARD-ISOGEMAGLUTINIERUNG VON SERUM- UND STANDARD-ERYTHROZYTEN (KREUZMETHODE)

Die Methode wird am häufigsten in serologischen Labors angewendet. Das Wesentliche des Verfahrens besteht darin, das Vorhandensein oder Fehlen von Gruppenantigenen A und B im untersuchten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren sowie von Gruppenantikörpern a und b unter Verwendung von Standard-Erythrozyten zu bestimmen.

• Die Ausrüstung für die Reaktion mit Standard-Erythrozyten unterscheidet sich darin, dass für die Agglutinationsreaktion Standard-Erythrozyten mit drei Blutgruppen erforderlich sind: 0 (1), A (II), B (III).

• Standard-Erythrozyten werden aus dem Blut von Spendern mit einer zuvor bekannten Blutgruppe hergestellt und bei 4-8 ° C gelagert.

Auf eine markierte Platte mit einer Pipette in sechs Zellen wird ein großer Tropfen Serum des Testbluts aus einem Reagenzglas (0,1 ml) aufgetragen und daneben ein kleiner Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten der Gruppen 0 (1), A (P), H (W) (zwei Reihen).

Ein Merkmal der Interpretation der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Erythrozyten ist, dass die Erythrozyten der Gruppe 0 (1) Kontrolle sind (sie enthalten keine Antigene, was eine spezifische Agglutinationsreaktion mit irgendeinem Serum grundsätzlich unmöglich macht)..

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH MONOKLONALE ANTIKÖRPER

Zur Bestimmung der Blutgruppe werden monoklonale Antikörper verwendet, für die die Hybridom-Biotechnologie verwendet wird.

Ein Hybridom ist ein Zellhybrid, der durch Fusion einer Knochenmarktumorzelle (Myelom) mit einem Immunlymphozyten gebildet wird, der spezifische monoklonale Antikörper synthetisiert. Das Hybridom erhält die Eigenschaften beider "Eltern": die Fähigkeit zu unbegrenztem Wachstum, die für eine Tumorzelle charakteristisch ist, und die Fähigkeit, Antikörper zu synthetisieren, die einem Immunlymphozyten innewohnen.

Es wurden Standardreagenzien entwickelt - monoklonale Antikörper (MCA): Anti-A- und Anti-B-Tsoliclone, die zur Bestimmung von Erythrozytenagglutinogenen verwendet werden. Zyklone sind lyophilisierte Pulver roter (Anti-A) oder blauer (Anti-B) Farbe, die unmittelbar vor der Untersuchung mit isotonischer Natriumchloridlösung verdünnt werden.

Die Zyklone Anti-A und Anti-B werden in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Etiketten auf eine weiße Platte aufgetragen: Anti-A oder Anti-B. Ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Testbluts wird neben die Tropfen der Antikörper aufgetragen. Nach dem Mischen der Komponenten wird die Agglutinationsreaktion 2-3 Minuten lang überwacht..

1940 entdeckten K. Landsteiner und A. S. Wiener ein völlig neues Antigen in menschlichen Erythrozyten, das sie Rh-Faktor (Rh) nannten. Der Rh-Faktor ist bei 85% der Menschen im Blut vorhanden, und 15% der Menschen enthalten diesen Faktor nicht. So ist es nach dem Rhesusaffen benannt, der es immer hat.

Rhesusantigene werden als Lipoproteine ​​klassifiziert. Sie sind sehr aktiv und in der Lage, die Bildung von Immunantikörpern zu induzieren.

Das Vorhandensein des Rh-Antigens wird in einem menschlichen Fötus ab 5-8 Wochen nachgewiesen und in einem 3-4 Monate alten Embryo gut exprimiert.

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BLUTTRANSFUSION|VERFAHREN ZUR BESTIMMUNG DES RHESUSFAKTORS

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Bestimmung der Kreuzblutgruppe (mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten)

Die Schlussfolgerung zur Gruppenzugehörigkeit wird auf der Grundlage der Anwesenheit oder Abwesenheit der Antigene A und B auf Erythrozyten sowie der Anwesenheit von Anti-A- und Anti-B-Antikörpern im untersuchten Blut getroffen. Für die Studie werden Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen 0, A, B, AB sowie Standard-Erythrozyten der Blutgruppen 0, A und B verwendet.

Standard-Isohämagglutinierungsserum der Blutgruppen 0 (Anti-A, Anti-B); A (Anti-B); B (Anti-A); AB;

Natriumchloridlösung 0,9%; Platten mit einer benetzten Oberfläche; Pipetten;

Glas- oder Plastikstäbchen; Standard-Erythrozyten A, B, 0.

Forschungsverfahren

1. Markieren Sie das Schild, für das der vollständige Name angegeben ist. eine Person, deren Blutgruppe bestimmt wird, sowie die Spezifität von isohämagglutinierenden Seren in der Reihenfolge ihrer Anwendung: 0 (Anti-A + B), A (Anti-B), B (Anti-A).

2. Tragen Sie einen großen Tropfen (0,1 ml) eines Standardserums der entsprechenden Gruppe auf. Verwenden Sie für die Forschung zwei Serien von Seren jeder Gruppe..

3. Auf den unteren Teil der Platte unter der entsprechenden Bezeichnung einen kleinen Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten 0, A, B auftragen.

4. Nehmen Sie vorsichtig Serum mit dem zu testenden Blut aus dem Reagenzglas und geben Sie einen großen Tropfen auf die vorbereiteten Standard-Erythrozyten..

5. Nehmen Sie mit derselben Pipette die Testerythrozyten aus dem Reagenzglas und geben Sie kleine Tropfen (0,01 ml) des Testbluts neben jeden Tropfen Standardseren.

Rühren Sie die Tropfen um und beobachten Sie den Reaktionsfortschritt durch Schütteln der Platte. Die Agglutination erfolgt normalerweise in der ersten Minute der Beobachtung, das Ergebnis der Reaktion wird jedoch nach fünf Minuten bewertet. Vor dem Ablesen der Ergebnisse 0,05 ml Natriumchloridlösung zu den Tropfen geben, bei denen eine Agglutination aufgetreten ist.

Klassische Blutgruppen AB0

Abhängig vom Vorhandensein der Agglutinogene A und B im ER und im Serum der entsprechenden Agglutinine α und β werden alle Personen in vier Gruppen eingeteilt: Agglutinite - AT alpha und beta, Agglutinogene - AG

• Gruppe 0 (I): Es gibt keine Agglutinogene im ER, im Serum gibt es α- und β-Agglutinine;

• Gruppe A (II): in ER - Agglutinogen A, in Serum - Agglutinin β;

• Gruppe B (III): Agglutinogen B ist im ER vorhanden, Agglutinin α wird im Serum nachgewiesen;

• Gruppe AB (IV): In den ER - Agglutinogenen A und B befinden sich keine Agglutinine im Serum.

Kürzlich wurden im AB0-System verschiedene klassische Antigene A und B sowie andere Antigene gefunden.

Antigen A-Subtypen: • Ein Subtyp1 hat eine höhere Adsorption von Agglutinin im Vergleich zu Agglutinogen A.2, (UND3, UND4, EINz - sind selten). Die Antigen-Subtypen B -1,2,3 haben keine klinische Bedeutung. Blutchimären - bei Zwillingen gefunden - gleichzeitiges Vorhandensein von ER, das zu 2 Phänotypen gehört.

Methoden zur Bestimmung der Blutgruppe

Die Gruppenzugehörigkeit von Blut gemäß dem AB0-System wird unter Verwendung der Agglutinationsreaktion bestimmt: • unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren; • Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-ER (Kreuzmethode); • Verwendung monoklonaler Antikörper (Anti-A- und Anti-B-Tsoliclone).

Bei einer geplanten ISO bestimmt der Arzt die Blutgruppe anhand von Standard-Isohämagglutinierungsseren. Anschließend sendet er das Blut an den Serologen ins Labor, um die Gruppe mit einer Kreuzmethode zu überprüfen. Wenn die Testergebnisse unterschiedlich sind, müssen beide Studien wiederholt werden.

Bestimmung von Blutgruppen unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren:

Nachweis der Gruppe AHs A und B im untersuchten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren. Verwenden Sie dazu die Agglutinationsreaktion.

Erforderlich: 1. Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen 0 (I), A (II), B (III) und AB (IV) in zwei verschiedenen Reihen. Seren zum Nachweis von Blutgruppen werden in speziellen serologischen Labors aus gespendetem Blut hergestellt. Die Seren werden bei 4-8 ° C (im Kühlschrank) gelagert. Der Einfachheit halber werden Standard-Hämagglutinierungsseren verschiedener Gruppen so getönt, dass sie eine bestimmte Farbe haben: 0 (I) - farblos, A (II) - blau, B (III) - rot, AB (IV) - hellgelb.

Reaktionsmethode

1. Der vollständige Name wird auf die Platte aufgebracht, wonach Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen I, II und III in einem Volumen von 0,1 ml (ein Tropfen von etwa 1 cm Durchmesser) aufgebracht werden. Um Fehler zu vermeiden, werden zwei Serien von Seren aus jeder der Gruppen angewendet, da eine der Serien möglicherweise eine geringe Aktivität aufweist und keine klare Agglutination ergibt. Insgesamt werden sechs Tropfen erhalten, die zwei Reihen mit drei Tropfen in der folgenden Reihenfolge von links nach rechts bilden: 0 (I), A (P), B (W).

2. Blut für Forschungszwecke wird einem Finger oder einer Vene entnommen. Sechs Tropfen Testblut, ungefähr so ​​groß wie ein Stecknadelkopf (0,01 ml, ein kleiner Tropfen), werden nacheinander mit einem trockenen Glasstab an sechs Stellen neben einem Tropfen Standardserum auf eine Platte übertragen (Blut ist zehnmal weniger als die Menge an Standardserum, mit der es gemischt wird ), dann mischen.

3. Nach dem Mischen wird die Platte regelmäßig geschaukelt..

Die Agglutination beginnt innerhalb der ersten 10 bis 30 s. Aufgrund der Möglichkeit einer späteren Agglutination, beispielsweise mit Erythrozyten der Gruppe A, sollte die Beobachtung jedoch bis zu 5 Minuten lang durchgeführt werden2(Ii).

4. In den Tropfen, in denen eine Agglutination aufgetreten ist, einen Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugeben, wonach das Ergebnis der Reaktion bewertet wird.

Der Agglutinationstest kann positiv oder negativ sein. Bei einer positiven Reaktion erscheinen in den ersten 10 bis 30 Sekunden normalerweise sichtbare kleine rote Körner (Agglutinate), die aus geklebten Erythrozyten bestehen. In diesem Fall ist das Serum teilweise oder vollständig verfärbt. Eine positive Reaktion kann sandig oder blütenblattförmig sein..

Im Falle einer negativen Reaktion bleibt der Tropfen gleichmäßig rot gefärbt, es werden keine Körner (Agglutinate) darin gefunden.

Es ist zu beachten, dass wenn die Seren aller drei Gruppen eine positive Reaktion zeigten, dies anzeigt, dass das Testblut beide Agglutinogene (A und B) enthält und zur Gruppe AB (IV) gehört..

Die Identifizierung von Untergruppen von Antigen A erfolgt in einem serologischen Labor unter Verwendung spezieller Extrakte aus Samen von Dolichos biflorus und Ulex Europeus. Der erste von ihnen agglutiniert Erythrozyten mit Antigen A.1, reagiert aber nicht mit Antigen A.2, und der zweite ist umgekehrt.

Kreuzgruppenbestimmung

Wird häufig in serologischen Labors verwendet. Das Wesentliche des Verfahrens besteht darin, das Vorhandensein oder Fehlen von Antigenen der Gruppen A und B im untersuchten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren sowie der Gruppenantikörper α und β unter Verwendung von Standard-Erythrozyten zu bestimmen. Die Reaktion mit Standardseren wird wie oben beschrieben durchgeführt..

Die Reaktion mit Standard-Erythrozyten wird wie folgt durchgeführt.

Die Ausrüstung für die Reaktion mit Standard-Erythrozyten unterscheidet sich darin, dass Standard-Erythrozyten mit drei Blutgruppen erforderlich sind: 0 (I), A (II), B (III). Standard-Erythrozyten werden aus dem Blut von Spendern mit einer zuvor bekannten Blutgruppe hergestellt, die bei 4 bis 8 ° C gelagert werden. Haltbarkeit 2-3 Tage.

Reaktionsmethode

1. Blut für Forschungszwecke wird aus einer Vene in ein trockenes Reagenzglas entnommen, zentrifugiert oder 20 bis 30 Minuten lang allein gelassen, um Serum zu erhalten.

2. Auf eine markierte Platte mit einer Pipette drei große Tropfen (0,1 ml) Serum des Testbluts aus einem Reagenzglas und daneben einen kleinen Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten von Gruppen auftragen.

3. Die Tropfen werden mit Glasstäben gemischt, die Platte wird 5 Minuten lang in Tröpfchen mit Agglutination geschüttelt, dann aus einer Natriumchloridlösung zugegeben.

Auswertung der Ergebnisse der Bestimmung der Blutgruppe nach der Kreuzmethode

Die Besonderheit der Interpretation der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Erythrozyten - Erythrozyten der Gruppe 0 (I) gelten als Kontrolle (sie enthalten keine Antigene, was eine spezifische Agglutinationsreaktion mit einem Serum grundsätzlich unmöglich macht)..

Das Ergebnis ist zuverlässig, wenn bei der Bewertung der Ergebnisse von p mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und mit Standard-Erythrozyten die Antworten über die untersuchte Blutgruppe übereinstimmen.

Bestimmung von Blutgruppen mit monoklonalen Antikörpern Es werden monoklonale Antikörper verwendet, für die die Hybridom-Biotechnologie verwendet wird.

Das Hybridom ist ein Zellhybrid, der durch Fusion einer Knochenmarktumorzelle (Myelom) mit einem Immunlymphozyten gebildet wird, der spezifische monoklonale Antikörper synthetisiert. Das Hybridom erhält die Eigenschaften beider „Eltern“: die Fähigkeit zu unbegrenztem Wachstum, die für eine Tumorzelle charakteristisch ist, und die Fähigkeit, Antikörper zu synthetisieren, die einem Immunlymphozyten innewohnen.

Die Zyklone Anti-A und Anti-B werden in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Etiketten auf eine weiße Platte aufgetragen: Anti-A und Anti-B. Daneben wird ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Testbluts aufgetragen. Nach dem Mischen der Komponenten wird die Agglutinationsreaktion 2-3 Minuten lang überwacht..

Mögliche Fehler • Geringe Qualität der Reagenzien (Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten können geringe agglutinierbare Eigenschaften aufweisen - siehe Haltbarkeit, Lagerbedingungen und Typ) • Technische Fehler (schlechte Beleuchtung, Temperatur über 25 - verlangsamt die Reaktion oder unter 15 - Agglutination aller Gruppen von Cr (Hinzufügen einer Inkonsistenz der Tropfen); • Merkmale des Testbluts.

15. Rh-Faktor ist bei 85% der Menschen im Blut vorhanden und bei 15% fehlt es.

Das Rhesus AG-System wird durch fünf grundlegende AGs dargestellt: D, C, C, E, e Katze befinden sich auf 2 Chromosomen. Die aktivste aller AG RhÖ(D) - Rh-Faktor. Je nach Anwesenheit oder Abwesenheit wird menschliches Blut in Rh-positive (Rh +) und Rh-negative (Rh -) unterteilt..

1) Methoden zur Bestimmung des Rh-Faktors in der klinischen Praxis: Verwenden Sie schnelle Methoden zur Bestimmung (D-Faktor). Für Forschungszwecke können Sie frisches, nicht geronnenes Blut, das vor dem Test einem Finger entnommen wurde, oder Blutkonserven ohne Vorbehandlung sowie Erythrozyten aus einem Reagenzglas nach der Bildung eines Gerinnsels und dem Absetzen des Serums verwenden.

Methode Die Untersuchung wird in Zentrifugenröhrchen mit einem Volumen von mindestens 10 ml durchgeführt. Ein Tropfen eines universellen Standardreagenzes, bei dem es sich um ein AB (IV) -Antirhesusserum handelt, das mit einer 33% igen Dextranlösung verdünnt ist, wird auf den Boden des Reagenzglases gegeben. Fügen Sie dann einen Tropfen Isse-Blut (oder ER) hinzu. Bei einer kreisförmigen Drehung des Reagenzglases wird der Inhalt über seine Innenfläche verschmiert, so dass sich der Inhalt entlang der Wände ausbreitet (beschleunigt p). Die Agglutination erfolgt innerhalb von 1 Minute, Sie sollten jedoch 3 Minuten warten. Um eine unspezifische EER-Aggregation auszuschließen, geben Sie 2-3 ml physiologische Lösung in das Reagenzglas und mischen Sie, indem Sie das Reagenzglas ein- oder zweimal umdrehen (ohne zu schütteln!). Interpretation der Ergebnisse Das Vorhandensein von Agglutination (große Flocken vor dem Hintergrund einer klaren Flüssigkeit) weist auf eine Rh-positive Zugehörigkeit hin. Fehlende Agglutination (homogen gefärbte rosa Flüssigkeit im Röhrchen) - Rh-negative Zugehörigkeit.

2) Labormethoden zur Bestimmung des Rh-Faktors

1. Die Methode der Agglutination in einem Salzmedium Verwenden Sie spezielle Seren, die vollständige Antikörper gegen Rhesus enthalten. Erythrozyten in Form einer 2% igen Suspension in isotonischer Natriumchloridlösung werden in Reagenzgläsern mit Anti-Rhesus-Serum kombiniert. Die Reagenzgläser werden 1 h in einen Thermostat bei einer Temperatur von 37 ° C gestellt, wonach das ER-Sediment am Boden mit einer Lupe untersucht und das Ergebnis durch seine Form berücksichtigt wird. Mit einem positiven Ergebnis (Rh +) weist das Sediment ein charakteristisches Muster in Form von Fäden oder Körnigkeit auf. Wenn negativ, die Form eines korrekt umrissenen Kreises.

2. Agglutinationsmethode in Gegenwart von Gelatine B Zwei Reagenzgläser werden in 0,02 bis 0,03 ml des Sediments der untersuchten Erythrozyten gegeben. Dann 2 Tropfen (0,1 ml) 10% ige Gelatinelösung und 2 Tropfen (0,1 ml) Anti-Rhesus-Serum in das erste Röhrchen geben, 2 Tropfen (0,1 ml) 10% ige Gelatinelösung in das zweite (Kontroll-) Röhrchen und 2 Tropfen (0,1 ml) Kochsalzlösung.

Der Inhalt wird vorsichtig gemischt. Dann werden die Röhrchen 30 Minuten in einem Thermostat bei einer Temperatur von 45-48ºC inkubiert, wonach 5-8 ml physiologische Lösung zugegeben werden und die Röhrchen zum Mischen 1-2 Mal umgedreht werden.

Das Ergebnis wird berücksichtigt, indem die Reagenzgläser mit bloßem Auge oder durch eine Lupe beleuchtet werden. Wenn die Notaufnahme Rh-positiv ist, agglutinieren sie. Mangel an Agglutination - Rh-negatives Blut. Es sollte keine Erythrozytenagglutination im Kontrollröhrchen geben.

3. Indirekter Antiglobulintest (Coombs-Reaktion) bei Schwierigkeiten bei der Bestimmung der Rh-Zugehörigkeit von Blut in Verbindung mit undeutlichen Ergebnissen. Die Reaktion basiert auf der Verwendung von Antiglobulinserum.

Wenn Rh-positive ERs mit unvollständigen Antikörpern behandelt werden, werden sie umhüllt und gegenüber Antiglobulinserum sensibilisiert, das sensibilisierte ERs agglutiniert, da es Antikörper gegen Globuline enthält.

Anti-Rhesus-Serum wird in das Reagenzglas gegeben und ER mit physikalischer Lösung gewaschen, 1 Stunde bei einer Temperatur von 37 ° C in einen Thermostat gestellt, wonach ER gründlich gewaschen wird. Die nachfolgende Reaktionsstufe wird in einer Ebene durchgeführt. Ein Tropfen ER-Suspension wird mit einer gleichen Menge Antiglobulinserum gemischt und das Ergebnis berücksichtigt. Das Vorhandensein von Agglutination ist ein Indikator dafür, dass die untersuchte Blutprobe Rh-positiv ist. Wenn keine Agglutination vorliegt, ist Rh negativ.

4. Reaktion mit anti-D-monoklonalen Antikörpern Ein großer Tropfen (0,1 ml) anti-D-monoklonaler Antikörper und ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Testbluts werden auf der Platte gemischt. Die Reaktion wird 3 Minuten lang überwacht. Wenn Anti-D-MKA mit Rh-positiven ER-Proben gemischt wird, wird eine schnell einsetzende Agglutination der Blütenblätter festgestellt. Wenn das Blut Rh-negativ ist, gibt es keine Agglutination.

16. BluttransfusionBlut ist eines der Gewebe des Körpers, daher kann die Bluttransfusion von einem Individuum zum anderen als Gewebetransplantation angesehen werden.

Der Wirkungsmechanismus des transfundierten Blutes Das transfundierte Blut wirkt auf die Elemente der Nervenrezeption sowie auf das Enzym- und Hormonstoffwechselsystem und verändert es auf allen Ebenen: vom molekularen zum Organgewebe. Das transfundierte Blut hat folgende Auswirkungen auf den Körper des Empfängers:

• Substitution (Ersatz des vom Körper verlorenen Teils des Blutes) • Hämodynamisch (bei Patienten mit akutem Blutverlust und traumatischem Schock führt dies zu einer anhaltenden Erhöhung des BCC, einer Erhöhung des venösen Flusses zum rechten Herzen, einer Erhöhung des Herzens und einer Erhöhung des winzigen Blutvolumens. immunologisch (aufgrund der Einführung von Granulozyten, Makrophagen, Lymphozyten, Komplementkomponenten, Ig, Zytokinen) • hämostatisch • stimulierend (Grundstoffwechsel steigt, Atmungskoeffizient steigt, Gasaustausch steigt).

Diese Seite wurde zuletzt am 18.09.2016 geändert. Urheberrechtsverletzung der Seite

Methoden zur Bestimmung der Blutgruppe

Es ist für jede Person nützlich, sich an ihre Blutgruppe zu erinnern. Dies kann im Notfall unerwartet nützlich sein. Nicht umsonst haben Soldaten eine Blutgruppe auf ihrer Tunika oder ihren Token. Es gibt kein Problem bei der Bestimmung der Blutgruppe. In großen Krankenhäusern wird dies von Labors durchgeführt. Aber auch in kleinen ländlichen Ambulanzen gibt es Standardsätze zur Bestimmung der Gruppe, und alle Ärzte und Sanitäter können die Analyse durchführen. Wenn Sie Spezialisten haben, müssen Sie dies nicht alleine tun.

Welche Blutgruppe des Kindes kann von den Eltern angenommen werden. Wenn Sie beispielsweise wissen, dass die Eltern eine zweite, dritte oder vierte haben, hoffen Sie nicht, dass das Kind die erste hat.

Tipps zur Home-Definition

Solche Ratschläge werden von Personen gegeben, die im Internet "leben" und wahllos Informationen sammeln. Manchmal ändern sie es auf ihre eigene Weise.

In der Tat gibt es eine Ernährungstheorie, die von der Art des Blutes abhängt, und es wurden Versuche unternommen, den Charakter der Persönlichkeit damit zu verbinden. Aber es wurde entwickelt, um die am besten geeignete Diät auszuwählen, um Krankheiten vorzubeugen. Sogar Psychologen hörten auf, über den Zusammenhang zwischen Persönlichkeitstyp und Blutzahl zu sprechen.

Darüber hinaus können Sie nicht nach Ihren Lieblingsgerichten oder Ihrer Neigung zur Führung über Ihre Gruppe beurteilen..

Lernen Sie zu Hause etwas Besseres aus vollwertigen Artikeln und kompetenten Ratschlägen. Möglicherweise gibt es medizinische Dokumente (ambulante Karte, Entlassung aus dem Krankenhaus), die Informationen über Ihr Blut enthalten.

Auf Wunsch von Spendern und Patienten von Krankenhäusern kann ein Reisepass mit diesen Informationen versehen werden.

Wer hat die Blutgruppen erfunden?

Der Pionier der vier Blutgruppen ist der österreichische Wissenschaftler und Arzt K. Landsteiner, der dafür 1930 den Nobelpreis für Medizin erhielt. Die Entdeckung ermöglichte es, Todesfälle aufgrund von Transfusionen zu verhindern und vorab die Kompatibilität von Spenderzeichen und Empfänger zu untersuchen.

Die Essenz des vorgeschlagenen AB0-Systems ist das Vorhandensein antigener Strukturen auf Erythrozyten bei Menschen und Tieren. Es gibt keine typischen Antikörper (Gammaglobuline) gegen sie im Plasma. Daher kann die Antigen + Antikörper-Reaktion zur Bestimmung verwendet werden.

Die Adhäsion roter Blutkörperchen erfolgt während des Treffens eines Antigens mit seinem Antikörper. Diese Reaktion wird als Hämagglutination bezeichnet. Es ist sichtbar, wenn es als kleine Flocken analysiert wird. Die Bestimmung der Blutgruppe basiert auf einem Bild der Agglutination mit typischen Seren.

Erythrozytenantigene vom Typ "A" binden mit "β" an Antikörper "ά" bzw. "B". Je nach Zusammensetzung des Blutes werden folgende unterschieden:

  • I oder 0 (ά, β) - es gibt überhaupt keine Antigene auf der Oberfläche von Erythrozyten;
  • II oder A (β) - Antigen A mit Antikörper β enthalten;
  • III oder B (ά) - es gibt ein Typ B-Antigen mit einem Antikörper ά;
  • IV oder AB (00) - hat beide Antigene, enthält aber keine Antikörper.

Antigene sind im menschlichen Embryo bereits in der Embryonalperiode vorhanden, und Antikörper (Agglutinine) erscheinen im Serum von Neugeborenen im ersten Lebensmonat.

Blutgruppenstandard (einfache Methode)

Um eine Analyse für eine Blutgruppe durchzuführen, werden die Erythrozyten des Patienten (aus einem Blutstropfen entnommen) und Standardseren mit bekannten Antigenen benötigt.

Auf eine flache Platte in zwei Reihen einen großen Tropfen von vier Seren geben (nur III und II sind ausreichend, aber 1 und 1 V werden zur Kontrolle genommen). Unter Verwendung verschiedener Glasstäbe (es ist zweckmäßig, Augenpipetten zu verwenden) wird das Testblut zu den Serumtropfen gegeben (das Verhältnis sollte etwa 1:10 betragen) und vorsichtig umrühren.

Schütteln Sie den Teller fünf Minuten lang, damit sich die Seren gut mit dem Blut vermischen können..

Ergebnisse dekodieren

Nach 5 Minuten können Sie die Analyseergebnisse auswerten. Bei großen Serumtropfen tritt eine Erleuchtung auf, bei einigen bilden sich kleine Flocken (Agglutinationsreaktion), bei anderen nicht. Hier sind die Optionen:

  • Wenn in beiden Proben keine Agglutination mit Seren der Gruppen III und II (+ Kontrolle 1 und 1 V) vorliegt, ist dies die erste Gruppe.
  • Wenn in allen außer II eine Gerinnung festgestellt wird, zeigt dies die zweite Gruppe an.
  • in Abwesenheit einer Agglutination mit nur III-Serum wird die dritte Blutgruppe gebildet;
  • wenn in allen Proben, einschließlich der 1V-Kontrollgruppe vier, eine Gerinnung festgestellt wird.

Wenn die Seren in der richtigen Reihenfolge angeordnet sind, die Signaturen auf der Platte angebracht sind, ist die Navigation einfach: Wo keine Agglutination vorliegt, eine solche Gruppe.

Es gibt Zeiten, in denen das Kleben nicht deutlich sichtbar ist. Dann wird die Analyse wiederholt, kleine Agglutination wird unter einem Mikroskop betrachtet.

Kreuzreaktionsmethode

Um die Gruppe mit nicht exprimierter Agglutination zu klären, wird die Methode der doppelten Kreuzreaktion mit Standard-Erythrozyten verwendet. In diesem Fall handelt es sich bei den bekannten nicht um Seren wie bei der einfachen Methode, sondern um Erythrozyten. Das Blut des Patienten wird in ein Reagenzglas gezogen, zentrifugiert und das Serum zur Untersuchung von oben mit einer Pipette abgepumpt.

2 große Tropfen Patientenserum werden auf eine flache weiße Platte getropft. Ihnen werden Standard-Erythrozyten der Blutgruppen A (II) und B (III) zugesetzt. Allmählich umrühren, den Teller schütteln.

Das Ergebnis wird nach 5 Minuten geschätzt:

  • wenn in beiden Tropfen eine Agglutination auftrat, die erste Gruppe;
  • wenn nicht in irgendeiner Stichprobe, die vierte Gruppe;
  • Wenn in einem der bekannten verwendeten Erythrozyten verwendet wird, wird die Gruppe durch das Vorhandensein oder Fehlen einer Koagulierbarkeit im Tropfen bestimmt.

Bestimmung der Gruppe durch Zoliclone

Zyklone sind synthetische Molkeersatzstoffe. Sie enthalten künstliche Ersatzstoffe für die Agglutinine ά und β. Sie werden als Erythrotest Tsoliklon Anti-A (pink) und Anti-B (blau) bezeichnet. Die erwartete Agglutination tritt zwischen den Erythrozyten des untersuchten Blutes und den Agglutininen der Tsoliclone auf.

Die Technik erfordert nicht die Verwendung von zwei Serien, sondern wird als genauer und zuverlässiger angesehen. Die Durchführung und Auswertung der Ergebnisse erfolgt wie bei der einfachen Standardmethode.

Art der TsoliclonesBlutgruppe
AgglutinationsergebnisAnti-AAnti-B
--0 (I)
+-A (II)
-+B (III)
++AB (IV)

Merkmal: Die vierte Gruppe AB (IV) wird notwendigerweise durch eine Agglutinationsreaktion mit einem spezifischen Tsoliclon "Anti-AB" und das Fehlen einer unspezifischen Adhäsion von Erythrozyten in isotonischer Natriumchloridlösung bestätigt.

Express-Methode mit einem Satz "Erythrotest-Gruppenkarten"

Mit dieser Methode können Sie die Gruppe und den Rh-Faktor im Labor und vor Ort bestimmen. Das Set enthält eine Karte mit Löchern. Getrocknete Reagenzien werden bereits auf den Boden der Vertiefungen aufgetragen. Hier wird zusätzlich zu "Anti-A", "Anti-B" und "Anti-AB" "Anti-D" verwendet, was das Ergebnis des Rh-Faktors ergibt.

Sie können Blut in jeder Form verwenden, eine Kombination mit einem Konservierungsmittel und aus einem Finger genommen ist geeignet.

Vor der Studie wird der Nachname des Patienten auf der Karte vermerkt. In jede Vertiefung wird ein Tropfen Wasser gegeben, um die Inhaltsstoffe aufzulösen. Dann wird Blut mit getrennten Stäbchen mit Reagenzien in die Vertiefungen gegeben und leicht gemischt. Das Endergebnis wird nach drei Minuten "gelesen".

Die Blutgruppe wird immer dann überprüft, wenn eine Transfusion erforderlich ist. Kontrollgruppe und individuelle Kompatibilität gleichzeitig. Tatsächlich finden sich im menschlichen Blut viel mehr antigene Eigenschaften als im AB0-System. Es ist nur so, dass sie sich in der Mehrheit der Bevölkerung schwach manifestieren..

Bei einem Patienten mit schwerwiegenden Krankheiten, die die Eigenschaften des Blutes und des Allergens des Körpers verändern, werden sie jedoch entscheidend und müssen mit dem Vorhandensein und dem Spiegel im Blut gerechnet werden. Das Wissen des Patienten über seine eigene Gruppe erhöht daher das Vertrauen in die Studie..

Bestimmung der Kreuzblutgruppe (unter Verwendung von Standardseren und Standarderythrozyten)

I. Unter den zuvor vorgenommenen Bezeichnungen wird ein großer Tropfen (0,1 ml) von Standardseren der Gruppen 0αβ (I), Aβ (II) und Bα (III) auf die Platte aufgetragen. Da Standardseren von zwei verschiedenen Reihen jeder Gruppe verwendet werden, werden insgesamt 6 Tropfen erhalten, die zwei Reihen von 3 Tropfen in der folgenden Reihenfolge von links nach rechts bilden: 0αβ (I), Aβ (II) und Bα (III).

II. Auf den unteren Teil der Platte wird ein kleiner Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten unter den entsprechenden Bezeichnungen in der folgenden Reihenfolge von links nach rechts aufgetragen: 0 (I), A (11) und B (III).

III. Das Serum wird mit einer Pipette aus dem Reagenzglas, das das Blut des Patienten enthält, entfernt (vorsichtig, um die Erythrozyten nicht zu schütteln), und ein großer Tropfen (0,1 ml) wird zu den vorbereiteten Standard-Erythrozyten gegeben. Danach werden mit derselben Pipette Erythrozyten des Testbluts aus dem Boden des Röhrchens entnommen und in einem kleinen Tropfen (0,01 ml) an 6 Punkten aufgetragen - ein Tropfen neben jedem Tropfen des hergestellten Standardserums.

IV. In allen Tropfen wird das Serum gründlich mit Erythrozyten (mit einem trockenen Glasstab) gemischt, die Platte wird geschüttelt, dann 1 - 2 Minuten lang in Ruhe gelassen und erneut periodisch geschüttelt.

Die Beobachtung des Reaktionsverlaufs erfolgt mindestens 5 Minuten. Die Agglutination in Tropfen mit Standardserum beginnt normalerweise schnell (10 - 30 s). Die Agglutination in Tropfen, in denen das Blutserum mit Standard-Erythrozyten getestet wird, kann aufgrund der Möglichkeit eines niedrigen Titers der im getesteten Serum enthaltenen Agglutinine zu einem späten Zeitpunkt (bis zum Ende der 5. Minute) auftreten.

V. Zu Beginn der Agglutination, jedoch nicht früher als nach 3 Minuten, wird ein Tropfen (0,05 ml) isotonische Natriumchloridlösung zu den Tropfen gegeben, in denen sie auftritt, und die Beobachtung wird fortgesetzt, während die Platte schaukelt, bis 5 Minuten verstrichen sind.

"Gruppensysteme von menschlichem Blut und
Bluttransfusionskomplikationen ", M. A. Umnova

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Medizinisches Krankheitsverzeichnis

Blutgruppen. Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors.

BLUTGRUPPEN.


Zahlreiche Studien haben gezeigt, dass verschiedene Proteine ​​(Agglutinogene und Agglutinine) im Blut vorhanden sein können, deren Kombination (Vorhandensein oder Nichtvorhandensein) vier Blutgruppen bildet.
Jede Gruppe erhält ein Symbol: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
Es wurde festgestellt, dass nur Blut derselben Gruppe transfundiert werden kann. In Ausnahmefällen, in denen kein Blut einer Gruppe vorhanden ist und eine Transfusion von entscheidender Bedeutung ist, ist eine Transfusion von Blut einer anderen Gruppe zulässig. Unter diesen Bedingungen kann Blut der Gruppe 0 (I) an Patienten mit jeder Blutgruppe transfundiert werden, und Patienten mit AB (IV) -Blut können mit Spenderblut jeder Gruppe transfundiert werden.

Daher ist es vor Beginn einer Bluttransfusion erforderlich, die Blutgruppe des Patienten und die transfundierte Blutgruppe genau zu bestimmen..

Bestimmung der Blutgruppe.


Zur Bestimmung der Blutgruppe verwenden sie Standardseren der Gruppen 0 (I), A (II), B (III), die speziell in Laboratorien von Bluttransfusionsstationen hergestellt werden.
Geben Sie auf einer weißen Platte in einem Abstand von 3-4 cm von links nach rechts die Nummern I, II, III ein, die Standardseren bezeichnen. Ein Tropfen der Standard-Serum-0 (I) -Gruppe wird mit einer Pipette auf den Sektor der Platte aufgetragen, angegeben durch die Nummer I; dann wird mit der zweiten Pipette ein Tropfen Serum A (II) -Gruppe unter der Nummer II aufgetragen; Nehmen Sie auch Serum B (III) der Gruppe und tragen Sie es mit einer dritten Pipette unter der Nummer III auf.

Dann wird das Subjekt mit einem Finger gestochen und das fließende Blut wird mit einem Glasstab in einen Tropfen Serum auf der Platte übertragen und gemischt, bis es gleichmäßig gefärbt ist. Auf jedes Blutserum wird ein neuer Stift übertragen. Nach 5 Minuten ab dem Zeitpunkt der Färbung (stundenweise!) Wird die Blutgruppe durch die Änderung der Mischung bestimmt. In dem Serum, in dem Agglutination auftritt (Adhäsion von Erythrozyten), sind deutlich rote Körner und Klumpen sichtbar; Im Serum, wo keine Agglutination auftritt, bleibt der Blutstropfen homogen und gleichmäßig rosa gefärbt.

Abhängig von der Blutgruppe des Probanden tritt in bestimmten Proben eine Agglutination auf. Wenn das Subjekt eine 0 (I) -Blutgruppe hat, erfolgt keine Verklebung von Erythrozyten mit Serum.
Wenn das Subjekt eine A (II) -Blutgruppe hat, gibt es keine Agglutination nur mit Serum der Gruppe A (II), und wenn das Subjekt eine B (III) -Gruppe hat, gibt es keine Agglutination mit Serum B (III). Eine Agglutination wird bei allen Seren beobachtet, wenn das untersuchte Blut der AB (IV) -Gruppe angehört.

Rhesusfaktor.


Manchmal werden sogar bei einer Bluttransfusion derselben Gruppe schwere Reaktionen beobachtet. Studien haben gezeigt, dass ungefähr 15% der Menschen ein spezielles Protein im Blut haben, den sogenannten Rh-Faktor..

Wenn diesen Personen wiederholt Bluttransfusionen verabreicht werden, die diesen Faktor enthalten, tritt eine schwerwiegende Komplikation auf, die als Rh-Konflikt bezeichnet wird, und es entsteht ein Schock. Daher müssen derzeit alle Patienten den Rh-Faktor bestimmen, da nur Rh-negatives Blut an einen Empfänger mit einem negativen Rh-Faktor transfundiert werden kann..

Beschleunigter Weg zur Bestimmung der Rh-Zugehörigkeit. Auf eine Petrischale aus Glas werden 5 Tropfen Anti-Rhesus-Serum der gleichen Gruppe wie die des Empfängers aufgetragen. Ein Tropfen Blut des Probanden wird dem Serum zugesetzt und gründlich gemischt. Die Petrischale wird in ein Wasserbad bei 42-45 ° C gestellt. Die Reaktionsergebnisse werden nach 10 Minuten ausgewertet. Wenn eine Blutagglutination auftritt, hat das Subjekt Rh-positives Blut (Rh +); Wenn keine Agglutination vorliegt, ist das getestete Blut Rh-negativ (Rh-).
Eine Reihe anderer Methoden zur Bestimmung des Rh-Faktors wurde entwickelt, insbesondere unter Verwendung des universellen Anti-Rh-Reagens D..

Es ist obligatorisch, die Blutgruppe und die Rh-Zugehörigkeit aller Patienten im Krankenhaus zu bestimmen. Die Ergebnisse der Studie müssen in den Reisepass des Patienten eingetragen werden.

Kreuzmethode zur Bestimmung der Blutgruppe nach dem AVO-System

Das Verfahren zur Bestimmung von Blutgruppen durch das ABO-System besteht darin, die Antigene A und B in Erythrozyten unter Verwendung von Standardantikörpern und unter Verwendung von Agglutininen im Plasma oder Serum des analysierten Blutes mit Standard-Erythrozyten nachzuweisen. Die Technik wurde zu Beginn des 20. Jahrhunderts entwickelt und wird in der Medizin immer noch aktiv eingesetzt. Die Bestimmung der Antigene A und B erfolgt dank Anti-A- und Anti-B-Tsoliclonen.

Bei Spendern werden immer nicht nur Antigene in Erythrozyten bestimmt, sondern auch Agglutinine im Serum (Plasma) unter Verwendung von Standard-Erythrozyten. Venöses Blut wird als Biomaterial verwendet. Vor der Studie ist es notwendig, fetthaltige Lebensmittel einen Tag vor der Analyse aufzugeben und eine halbe Stunde vor dem Test nicht zu rauchen. Blutgruppen werden zweimal bestimmt: zuerst in der medizinischen Abteilung, wo das Material beschafft wird, und dann durch Forschung im Labor bestätigt.

Die Bestimmung von Blutgruppen durch das ABO-System ist der Haupttest in der Transfusionsmedizin. Einige Tiere haben auch ein ähnliches Blutgruppensystem, wie Schimpansen, Gorillas und Bonobos..

In der Wissenschaft gibt es eine allgemein anerkannte Meinung, dass die Methode zur Bestimmung von Blutgruppen nach dem ABO-System erstmals 1900 von dem österreichischen Wissenschaftler Karl Landsteiner identifiziert wurde. Dann beschrieb er in seiner Arbeit drei Arten von Antigenen. Dafür erhielt er 30 Jahre später den Nobelpreis für Medizin und Physiologie. Aufgrund der Tatsache, dass es zuvor keine engen Beziehungen zwischen Wissenschaftlern gab, wurde später festgestellt, dass der tschechische Serologe Jan Jansky unabhängig von K. Landsteiners Forschungen zunächst vier menschliche Blutgruppen beschrieb, seine Forschungen jedoch einem breiten Publikum nicht bekannt waren. Derzeit wird in Russland und den Republiken der ehemaligen UdSSR die von Y. Yansky entwickelte Klassifikation verwendet. In den USA schuf W. L. Moss 1910 sein ähnliches Werk.

Die Blutgruppe sollte in einem Raum mit guter Beleuchtung unter Einhaltung eines Temperaturbereichs von 15 bis 25 Grad Celsius bestimmt werden, da Abweichungen von dieser Norm die Testergebnisse beeinflussen können. Die Initialen und der Nachname des Patienten sind auf einen Teller oder eine Platte geschrieben. Von links nach rechts oder in einem Kreis werden die Standardbezeichnungen von Gruppen angewendet (O (I), A (II), B (III)). Darunter wird tropfenweise das entsprechende Serum mit separaten Pipetten für jeden Typ platziert. Dann wird ihnen das Blut des Patienten hinzugefügt. Das Forschungsmaterial stammt aus dem Ohrläppchen oder dem Finger. Dies ist für die Technik der Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO-System erforderlich.

Es ist auch legal, rote Blutkörperchen in einem Reagenzglas zu verwenden, nachdem sich ein Gerinnsel gebildet hat. Die Menge an Serum muss das Zehnfache der Menge an zugesetztem Blut betragen. Danach werden die Tropfen mit Glasstäben gemischt (jeweils separat). Beobachten Sie innerhalb von fünf Minuten durch leichtes Schütteln der Platte das Auftreten der Hämagglutinationsreaktion. Es liegt in der Tatsache, dass kleine rote Klumpen auftreten und dann zu größeren verschmelzen. Das Serum verliert zu diesem Zeitpunkt fast vollständig an Farbe..

Um eine falsche Hämagglutination durch einfaches Kleben von Erythrozyten zu vermeiden, müssen Sie nach drei Minuten einen Tropfen Kochsalzlösung hinzufügen und prüfen, ob die Agglutination bestehen bleibt. Wenn ja, dann ist es wahr. Die Definition der Blutgruppen nach dem ABO-System ist nun abgeschlossen.

Als Ergebnis können vier Reaktionen beobachtet werden:

  • Bei keinem der Seren tritt eine Agglutination auf - die erste Gruppe ist O (I);
  • die Reaktion manifestierte sich mit den Seren I (ab) und III (a) - der zweiten Gruppe A (II);
  • Agglutination tritt mit Seren I (ab) und II (b) auf - der dritten Gruppe B (III);
  • Wenn die Reaktion mit drei Seren abläuft, muss ein zusätzliches Verfahren mit Reagenzien der Gruppe AB (IV) durchgeführt werden, die Standard sind. Wenn in einem solchen Tropfen keine Agglutination vorliegt, können wir davon ausgehen, dass dies die 4. Blutgruppe AB (IV) ist..

Das Verfahren zur Bestimmung von Blutgruppen nach dem ABO-System beinhaltet den gleichzeitigen Nachweis des Rh-Faktors (Rh).

Die Oberfläche der Platte wird vorab angefeuchtet und mit "Kontrollserum" und "Anti-Rhesus-Serum" beschriftet. Dann werden ein oder zwei Tropfen der erforderlichen Reagenzien unter die Inschriften gegeben und das analysierte Material wird zu ihnen gegeben. Dazu können Sie auch Blut von einem Finger (in der gleichen Menge wie das Serumvolumen) oder Erythrozyten verwenden, die am Boden des Röhrchens verbleiben, nachdem ein Gerinnsel aufgetreten ist (die Hälfte des Serumvolumens). Die Wahl des Materials hat keinen Einfluss auf das Endergebnis. Dann werden Blut und Serum mit einem trockenen Glasstab gemischt, wonach die Reaktion für fünf Minuten erwartet wird. Um falsche Messwerte zu vermeiden, wird nach drei bis vier Minuten (nur wenige Tropfen) eine isotonische Natriumchloridlösung zugegeben. Die Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO- und Rh-System erfolgt sehr häufig.

Wenn eine Agglutination von Erythrozyten im Serumtropfen auftritt, deutet dies auf ein positives Rh-Blut hin. Laut Statistik kommt Rh + in 85% der Weltbevölkerung vor. Seine Abwesenheit erlaubt es uns, von einer Rh-negativen Zugehörigkeit zu sprechen. Wenn im Kontrollserum eine Agglutination auftritt, ist diese unbrauchbar geworden. Leider funktioniert der ABO-Algorithmus zur Bestimmung der Blutgruppe nicht immer einwandfrei.

Ungenauigkeiten bei der Bestimmung der Zugehörigkeit von Blut zu einer bestimmten Gruppe hängen von folgenden Gründen ab:

  • Technisch.
  • Biologische Spezifität des untersuchten Blutes.
  • Defekter Charakter von Standardseren und Erythrozyten.

Mögliche Fehler bei der Kreuzbestimmung der Blutgruppe des ABO-Systems:

  • Serum auf der Platte verlegt.
  • Falsche quantitative Materialanteile.
  • Verwendung von nicht ausreichend sauberen Platten oder Platten, die mit Blut in Kontakt kommen (jedes Serum muss mit einer separaten Pipette gesammelt werden, die mit einer Natriumchloridlösung (in einer Konzentration von 0,9%) gewaschen werden muss)..
  • Falsche Aufzeichnung des analysierten Materials.
  • Nichtbeachtung der Zeit, die für den Beginn der Agglutination erforderlich ist - Sie sollten die Reaktion nicht vor Ablauf von fünf Minuten beschleunigen, da sich möglicherweise schwache Agglutinogene im Blut befinden. Eine Überbelichtung lohnt sich auch nicht, da die Tropfen an den Rändern austrocknen und zu falschen Schlussfolgerungen führen können. Es ist wichtig, die Regeln zur Bestimmung der Blutgruppe gemäß dem ABO-System zu befolgen.
  • Eine fehlerhafte Zentrifugation kann auch zu falschen Ergebnissen führen..
  • Eine Lufttemperatur, die den zulässigen Wert überschreitet, wirkt sich auf das Fehlen einer Agglutination aus. Um Fehler dieser Art zu vermeiden, müssen Sie ein spezielles Serum verwenden, das für die Arbeit in heißen Klimazonen entwickelt wurde. Sie müssen Blutgruppen auf einer Platte oder Platte bestimmen, deren äußere Oberfläche in kaltes Wasser abgesenkt ist.

Fehler, die mit der biologischen Spezifität des analysierten Blutes verbunden sind, werden in zwei Typen unterteilt.

  • Abhängig von den Eigenschaften der Erythrozyten.
  • Fehler aufgrund biologischer Eigenschaften des Serums.

Betrachten wir jeden Typ genauer.

  • Späte Agglutination aufgrund "schwacher" Formen von Erythrozyten und Antigenen. Um Fehler zu vermeiden, ist es notwendig, die Blutgruppe von Spendern und Empfängern unter Verwendung von Standard-Erythrozyten zu bestimmen. Agglutinogen A identifizieren2 sollte mit anderen Arten von Reagenzien und anderen Utensilien erneut untersucht werden, um die Zeit für die Registrierung der Reaktion zu verlängern.
  • "Panagglutination" ("Autoagglutination") - die Fähigkeit des Blutes, mit allen Seren, einschließlich seiner eigenen, die gleiche unspezifische Reaktion zu zeigen. Nach fünf Minuten schwächt sich der Schweregrad einer solchen Agglutination ab, obwohl er zunehmen sollte. Ähnliche Fälle werden bei Krebspatienten, Verbrennungspatienten usw. beobachtet. Als Kontrolle ist es notwendig, die Manifestation der Agglutination der analysierten Erythrozyten im Standardserum der vierten Gruppe und in Kochsalzlösung zu bewerten. Bei der "Panagglutination" wird die Blutgruppe als Ergebnis des dreifachen Waschens von Erythrozyten bestimmt. Wenn das gewünschte Ergebnis nicht erzielt wird, lohnt es sich, eine Blutprobe erneut in ein vor dem Eingriff erwärmtes Röhrchen zu ziehen und die Probe in einen Wärmebehälter zu legen, um die Temperatur von 37 Grad Celsius und darüber aufrechtzuerhalten. Dann sollte es ins Labor gebracht werden, wo die oben angegebene Temperatur aufrechterhalten wird und erhitzte Salzlösung, Platte und Reagenzien verwendet werden.
  • Manchmal sind die Erythrozyten des analysierten Blutes wie "Münzsäulen" angeordnet und können mit Agglutinaten verwechselt werden. Wenn Sie zwei Tropfen isotonische Lösung hinzufügen und die Tablette vorsichtig schütteln, befinden sich die roten Blutkörperchen in der richtigen Position.
  • Unvollständige oder gemischte Agglutination bei Patienten der zweiten, dritten und vierten Gruppe infolge einer Knochenmarktransplantation oder in den ersten drei Monaten nach Bluttransfusion 0 (I).
  • Während Routinetests werden Antikörper mit einer anderen Spezifität als Ergebnis einer vorherigen Sensibilisierung nachgewiesen. Es ist notwendig, es zu bestimmen und Erythrozyten ohne den Gehalt des Antigens auszuwählen, gegen das eine Immunisierung nachgewiesen wurde. Der Empfänger muss sicher sein, ein kompatibles Spenderblut individuell auszuwählen.
  • Es gibt keine Antikörper A und B, die bei Neugeborenen und Patienten mit Unterdrückung der humoralen Immunität beobachtet werden.
  • Im Falle der Bildung von "Münzsäulen" muss das abnormale Ergebnis durch Einnahme von Standard-Erythrozyten der ersten Gruppe bestätigt werden. Natriumchloridlösung und Plattenschütteln helfen bei der Unterscheidung zwischen echten Agglutinaten und Münzstapeln.

Schwache Seren mit einem Verfallsdatum oder einem Titer von weniger als 1:32 können eine schwache und späte Agglutination erzeugen. Die Verwendung solcher Reagenzien ist nicht akzeptabel..

Die Verwendung unbrauchbarer Standard-Erythrozyten oder Seren, die unter nicht sterilen Bedingungen hergestellt und unzureichend konserviert wurden, führt zum Auftreten einer "bakteriellen" Agglutination unspezifischer Natur..

Es gibt viele populäre Annahmen über die Blutgruppen des ABO-Systems, die unmittelbar nach seiner Entdeckung in verschiedenen Weltkulturen auftraten. So gewann beispielsweise in den 30er Jahren des letzten Jahrhunderts in Japan und einigen anderen Ländern die Theorie, die eine Blutgruppe mit einer bestimmten Art von Persönlichkeit verbindet, an Popularität. Ähnliche Theorien sind heute populär..

Es wird auch angenommen, dass eine Person mit Gruppe A anfällig für schweren Kater ist, O mit guten Zähnen assoziiert ist und Gruppe A2 den höchsten IQ-Wert aufweist. Solche Behauptungen sind jedoch nicht wissenschaftlich belegt..

Wir untersuchten die Bestimmung von Blutgruppen nach dem ABO-System unter Verwendung von Standardseren.

Basierend auf Materialien von fb.ru.

Die Methode wird am häufigsten in serologischen Labors angewendet. Das Wesentliche des Verfahrens besteht darin, das Vorhandensein oder Fehlen von Antigenen der Gruppen A und B im untersuchten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren sowie der Gruppenantikörper α und β unter Verwendung von Standard-Erythrozyten zu bestimmen. Die Reaktion mit Standardseren wird wie oben beschrieben durchgeführt..

Die Reaktion mit Standard-Erythrozyten wird wie folgt durchgeführt.

Die Ausrüstung für die Reaktion mit Standard-Erythrozyten unterscheidet sich darin, dass Standard-Erythrozyten mit drei Blutgruppen erforderlich sind: 0 (I), A (II), B (III). Standard-Erythrozyten werden aus dem Blut von Spendern mit einer zuvor bekannten Blutgruppe hergestellt, die bei 4 bis 8 ° C gelagert werden. Haltbarkeit 2-3 Tage.

Reaktionsmethode

1. Blut für Forschungszwecke wird aus einer Vene in ein trockenes Reagenzglas entnommen, zentrifugiert oder 20 bis 30 Minuten lang allein gelassen, um Serum zu erhalten.

2. Auf eine markierte Platte mit einer Pipette drei große Tropfen (0,1 ml) Serum des Testbluts aus einem Reagenzglas und daneben einen kleinen Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten von Gruppen auftragen.

3. Weitere Maßnahmen werden ähnlich wie bei Standard-Isohämagglutinierungsseren durchgeführt: Die entsprechenden Tropfen werden mit Glasstäben gemischt, die Tablette wird geschüttelt, 5 Minuten lang beobachtet, isotonische Natriumchloridlösung wird zu den Tropfen mit Agglutination gegeben, wonach das Ergebnis bewertet wird.

Tabelle 6-3. Auswertung der Ergebnisse der Bestimmung der Blutgruppe nach der Kreuzmethode

Bewerten Sie die in beiden Reaktionen erhaltenen Daten (mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten - Tabelle 6-3)..

Die Besonderheit der Interpretation der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Erythrozyten - Erythrozyten der Gruppe 0 (I) gelten als Kontrolle (sie enthalten keine Antigene, was eine spezifische Agglutinationsreaktion mit einem Serum grundsätzlich unmöglich macht)..

Das Ergebnis der Kreuzmethode wird nur dann als zuverlässig angesehen, wenn bei der Bewertung der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und mit Standard-Erythrozyten die Antworten über die Gruppe des untersuchten Blutes übereinstimmen. Geschieht dies nicht, sollten beide Reaktionen wiederholt werden.

Monoklonale Antikörper werden verwendet, um die Blutgruppe zu bestimmen, für die die Hybridom-Biotechnologie verwendet wird.

Das Hybridom ist ein Zellhybrid, der durch Fusion einer Knochenmarktumorzelle (Myelom) mit einem Immunlymphozyten gebildet wird, der spezifische monoklonale Antikörper synthetisiert. Das Hybridom erhält die Eigenschaften beider "Eltern": die Fähigkeit zu unbegrenztem Wachstum, die für eine Tumorzelle charakteristisch ist, und die Fähigkeit, Antikörper zu synthetisieren, die einem Immunlymphozyten innewohnen.

Tabelle 6-4. Schema zur Bewertung der Ergebnisse der Bestimmung von Blutgruppen unter Verwendung monoklonaler Antikörper (Anti-A- und Anti-B-Tsoliclone)

Es wurden Standardreagenzien entwickelt - monoklonale Antikörper: Anti-A- und Anti-B-Tsoliclone zur Bestimmung von Erythrozytenagglutinogenen.

Tsolyklone werden in Form eines lyophilisierten Pulvers von roter (Anti-A) oder blauer (Anti-B) Farbe verwendet. Das Pulver wird unmittelbar vor der Untersuchung mit isotonischer Natriumchloridlösung verdünnt.

Reaktionstechnik

Die Zyklone Anti-A und Anti-B werden in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Etiketten auf eine weiße Platte aufgetragen: Anti-A und Anti-B. Daneben wird ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Testbluts aufgetragen. Nach dem Mischen der Komponenten wird die Agglutinationsreaktion 2-3 Minuten lang überwacht..

Die Auswertung der Ergebnisse ist sehr einfach (Tabelle 6-4).

Die Methode zur Bestimmung der Blutgruppe mit Tsoliclones ermöglicht es Ihnen, auf die aus Spenderblut gewonnenen isohämagglutinierenden Standardseren zu verzichten.

Basierend auf Materialien von studfiles.net

13. Methoden zur Bestimmung der Gruppenzugehörigkeit. Kreuzmethode zur Bestimmung von Blutgruppen nach dem "avo" -System, dessen Zweck.

Siehe die vorherigen Methoden. Vopr. (isohämagglutinierende Seren, Standard-Erythrozyten, Tsoliclone)

Crossover - wir bestimmen sowohl Antigene als auch Antikörper → genauer nirgendwo

Klinisches Bild und Diagnose von Blutungen in das Lumen des Magen-Darm-Trakts.

Gastrointestinale Blutungen sind eine schwerwiegende Komplikation von Erkrankungen des Magen-Darm-Trakts (meistens Magengeschwüre und Zwölffingerdarmgeschwüre). Wenn Blutungen auftreten, fließt Blut in das Lumen des Magen-Darm-Trakts (die Magen- und Darmhöhle). Das Volumen des Blutverlusts kann sehr schwerwiegend sein (bis zu 3-4 Liter) und das Leben des Patienten gefährden.

Symptome einer gastrointestinalen Blutung

Die Symptome einer Magen-Darm-Blutung hängen von der Quelle und der Menge des verlorenen Blutes ab..

Erbrechen von Blut. Blut im Erbrochenen kann sein:

unverändert (mit Blutungen aus dem Magen, Krampfadern der Speiseröhre, durch Erosionen (Oberflächendefekte der Schleimhaut) der Speiseröhre);

verändert (bei Wechselwirkung mit Salzsäure des Magens wird das Blut braun). Erbrechen "wie Kaffeesatz" (braun) ist charakteristisch: mit Blutungen aus Magen- oder Zwölffingerdarmgeschwüren, mit Mallory-Weiss-Syndrom - Blutungen aus Rupturen der Magenschleimhaut.

Bei Blutungen aus dem unteren Magen-Darm-Trakt ist Erbrechen nicht typisch.

Stuhl mit Blut. Blut im Stuhl kann auch sein:

unverändert (mit einem einstufigen Blutverlust von mehr als 100 ml bei Blutungen aus einem Magengeschwür oder Zwölffingerdarmgeschwür sowie aus den unteren Teilen des Magen-Darm-Trakts);

verändert (mit längerer Blutung aus dem oberen Gastrointestinaltrakt). 4-6 Stunden nach Beginn der Blutung erscheinen teerige schwarze Stühle (Melena). Bei latenten ulzerativen Blutungen kann Melena das einzige Symptom für Blutungen sein. Befindet sich die Blutungsquelle im Magen, in kleinen oder anfänglichen Teilen des Dickdarms, wird das Blut normalerweise gleichmäßig mit Kot vermischt, wobei sich Blutungen aus dem Rektum in getrennten Gerinnseln vor dem Hintergrund unveränderter Fäkalien befinden.

Häufige Symptome von Blutverlust:

Die Schwere dieser Symptome hängt von der Höhe des Blutverlusts ab und kann von leichtem Unwohlsein und Schwindel (mit einer starken Veränderung der Körperposition) bis zu tiefer Ohnmacht und Koma (dauerhafter Bewusstseinsverlust) variieren. Bei chronischen Blutungen gibt es Anzeichen einer Anämie (Anämie):

Blässe der Haut und der Schleimhäute;

Verschlechterung des allgemeinen Gesundheitszustands;

akute und chronische Blutungen;

offensichtliche und latente Blutung;

einzelne und wiederkehrende (sich wiederholende) Blutungen.

Je nach Blutungsquelle werden verschiedene Formen der Krankheit unterschieden..

Blutungen aus dem oberen Magen-Darm-Trakt:

Zwölffingerdarm (aus dem Zwölffingerdarm).

Blutungen aus dem unteren Magen-Darm-Trakt:

Die Schwere des Blutverlusts kann sein:

Die Diagnose von Magen-Darm-Blutungen basiert auf:

Analyse der Anamnese der Krankheit und Beschwerden (wenn die Symptome der Krankheit auftraten, mit denen der Patient ihr Aussehen und ihre Entwicklung in Verbindung bringt);

Anamnese des Lebens (frühere Krankheiten, schlechte Gewohnheiten, Vererbung);

klinische Untersuchung. Bei gastrointestinalen Blutungen ist neben einer allgemeinen Untersuchung eine rektale Untersuchung (Untersuchung des Rektums) erforderlich. Es hilft, charakteristische Veränderungen in der Farbe von Fäkalien zu identifizieren und bei Blutungen aus einer Analfissur oder Hämorrhoiden die Blutungsquelle zu erkennen.

Allgemeiner Bluttest - hilft bei der Identifizierung einer Abnahme der Anzahl roter Blutkörperchen und des Hämoglobins, die für Blutungen charakteristisch sind;

Analyse von Kot auf okkultes Blut - hilft beim Erkennen von Blutspuren im Kot, wenn die Menge an verlorenem Blut nicht ausreicht, um seine Farbe zu ändern;

eine Blutuntersuchung auf Blutplättchen (auf Blutungen im Zusammenhang mit einer Blutungsstörung);

Koagulogramme (ein Bluttest, der die Geschwindigkeit und Qualität des Blutgerinnungsprozesses widerspiegelt);

endoskopische Untersuchung. Bei Blutungen aus dem oberen Gastrointestinaltrakt ist eine FEGDS (Fibroesophagogastroduodenoskopie) erforderlich.

Diese Studie wird mit einem Endoskop durchgeführt, das unter Aufsicht des Arztes in die Mundhöhle des Patienten eingeführt wird. Während der endoskopischen Untersuchung können neben der Erkennung einer Blutungsquelle auch medizinische Verfahren durchgeführt werden, um Blutungen zu stoppen - Koagulation (Kauterisation) oder Abschneiden (Auferlegen von Metallklammern) beschädigter Gefäße (Blutungsquellen). Befindet sich die Blutungsquelle im Dickdarm, wird eine Sigmoidoskopie (instrumentelle Untersuchung des Rektums und des Sigmas) oder eine Koloskopie (endoskopische Untersuchung des Dickdarms mit einem Koloskop - ein Gerät, mit dem die Schleimhaut des Dickdarms untersucht wird) verwendet, das sowohl diagnostisch als auch diagnostisch sein kann medizinische Verfahren.

Klinik für akute Blutungen und Blutverlust. Möglichkeiten zur Bekämpfung des akuten Blutverlustes.

Die klassischen Anzeichen von Blutungen sind:

• blasse, feuchte Haut;

• Schwindel, besonders beim Anheben des Kopfes;

• "dunkel in den Augen", "fliegt" vor den Augen;

Objektive Forschungsdaten:

• blasse Haut, kalter Schweiß, Akrocyanose;

• Lethargie und andere Bewusstseinsstörungen;

• Tachykardie, fadenförmiger Puls;

Anzeichen von Blutverlust: Blässe und Feuchtigkeit der Haut, eingefallenes Gesicht, häufiger und kleiner Puls, erhöhte Atmung, in schweren Fällen Atmung vom Typ Cheyne-Stokes, Senkung des CVP und des Blutdrucks. Subjektive Symptome: Schwindel, Mundtrockenheit, Durst, Übelkeit, Verdunkelung der Augen, zunehmende Schwäche. Bei einem langsamen Blutfluss entsprechen klinische Manifestationen jedoch möglicherweise nicht der Menge an verlorenem Blut.

Faktoren, die die Selbstkontrolle von Blutungen stimulieren. Blutungsklassifikationen.

ERSTE ÜBER HÄMOSTASIS, ERINNERN SIE SICH AN PROPEDA LIEBE!

Blutung (Hämorrhagie) - das Abfließen (Entweichen) von Blut aus dem Lumen eines Blutgefäßes aufgrund einer Beschädigung oder Verletzung der Durchlässigkeit seiner Wand.

• Arterielle Blutung. Das Blut fließt schnell unter Druck, oft in einem pulsierenden Strom, von hellscharlachroter Farbe ab. Die Blutverlustrate ist ziemlich hoch. Die Höhe des Blutverlusts hängt vom Kaliber des Gefäßes und der Art des Schadens ab (seitlich, vollständig usw.)..

• Venenblutung. Kontinuierliches Ausbluten der Kirschfarbe. Die Blutverlustrate ist niedriger als bei arteriellen Blutungen, kann jedoch bei einem großen Durchmesser der beschädigten Vene sehr signifikant sein. Nur wenn sich die beschädigte Vene neben einer großen Arterie befindet, ist das Pulsieren des Strahls aufgrund des Transmissionspulsierens möglich. Beachten Sie bei Blutungen aus den Halsvenen die Gefahr einer Luftembolie..

• Kapillarblutung. Gemischte Blutungen durch Schädigung von Kapillaren, kleinen Arterien und Venen. In diesem Fall ist in der Regel die gesamte Wundoberfläche nach dem Trocknen wieder mit Blut bedeckt. Solche Blutungen sind normalerweise weniger massiv als bei Schäden an größeren Gefäßen..

• Parenchymblutungen treten aufgrund von Schäden an Parenchymorganen auf: Leber, Milz, Nieren, Lunge. In der Tat ist es Kapillarblutung, aber in der Regel gefährlicher, was mit den anatomischen und physiologischen Merkmalen der Organe verbunden ist.

Durch den Mechanismus des Auftretens

Abhängig von der Ursache des Auftretens gibt es drei Arten von Blutungen:

• Hämorrhagie pro Rhexin - Blutung aufgrund mechanischer Beschädigung (Bruch) der Gefäßwand - die häufigste Art von Blutung

• Hämorrhagie pro Diabrosin - Blutung während der Arrosion (Zerstörung, Ulzeration, Nekrose) der Gefäßwand aufgrund eines pathologischen Prozesses. Solche Blutungen treten während des Entzündungsprozesses, des Tumorverfalls, der enzymatischen Peritonitis usw. auf..

• Hämorrhagie pro Diapedesin - Blutung unter Verletzung der Gefäßwandpermeabilität auf mikroskopischer Ebene. Eine Erhöhung der Durchlässigkeit der Gefäßwand tritt bei Krankheiten wie Vitamin C-Mangel, hämorrhagischer Vaskulitis, chronischem Nierenversagen, Scharlach, Sepsis usw. auf..

Eine gewisse Rolle bei der Entwicklung von Blutungen spielt der Zustand des Blutgerinnungssystems. Eine Störung der Thrombusbildung an sich führt nicht zu Blutungen, sondern kompliziert die Situation erheblich. Wenn eine kleine Vene beschädigt ist, wird das spontane Blutstillungssystem ausgelöst. Wenn jedoch der Zustand des Gerinnungssystems beeinträchtigt ist, kann jede selbst kleinste Verletzung zu tödlichen Blutungen führen. Eine bekannte Gerinnungsstörung namens Hämophilie.

In Bezug auf die äußere Umgebung

Auf dieser Basis werden alle Blutungen in zwei Haupttypen unterteilt: externe und interne.

In Fällen, in denen Blut aus der Wunde in die äußere Umgebung fließt, spricht man von äußeren Blutungen. Solche Blutungen sind offensichtlich und werden schnell diagnostiziert. Externe Blutungen umfassen auch Drainageblutungen aus einer postoperativen Wunde..

Innere Blutungen werden als Blutungen bezeichnet, bei denen Blut in das Lumen von Hohlorganen, Geweben oder inneren Hohlräumen des Körpers gelangt. Es gibt offene und versteckte innere Blutungen. Interne explizite Blutungen sind solche, bei denen Blut, auch in veränderter Form, nach einer bestimmten Zeit im Freien auftritt und daher die Diagnose ohne komplexe Untersuchung und Identifizierung spezieller Symptome gestellt werden kann. So tritt beispielsweise bei Blutungen aus einem Magengeschwür Blut in sein Lumen ein, und wenn es ausreichend akkumuliert ist, tritt Erbrechen auf. Bei Kontakt mit Salzsäure ändert das Blut im Magen seine Farbe und Konsistenz - es kommt zum sogenannten "Kaffeesatz" -Erbrechen. Wenn die Blutung nicht massiv ist oder sich das Geschwür im Zwölffingerdarm befindet, gelangt das Blut auf natürliche Weise zum Darminhalt und tritt in Form von schwarzem Kot (Melena) durch den Anus aus. Interne offensichtliche Blutungen umfassen auch Blutungen aus dem Gallensystem - Hämobilie, Nieren und Harnwege - Hämaturie.

Bei latenten inneren Blutungen fließt Blut in verschiedene Hohlräume und ist daher nicht sichtbar. Der Blutabfluss in die Bauchhöhle wird als Hämoperitoneum bezeichnet, in die Brusthöhle - Hämothorax, in die Perikardhöhle - Hämoperikard, in die Gelenkhöhle - Hämartrose. Bei Blutungen in die seröse Höhle setzt sich Plasmafibrin auf dem serösen Integument ab, das abfließende Blut wird defibriniert und gerinnt normalerweise nicht.

Zum Zeitpunkt des Auftretens der Blutung kann primär und sekundär sein.

Das Auftreten einer primären Blutung ist mit einer direkten Schädigung des Gefäßes während eines Traumas verbunden. Es manifestiert sich sofort oder in den ersten Stunden nach dem Schaden.

Sekundärblutungen treten früh (normalerweise mehrere Stunden bis 4-5 Tage nach der Verletzung) und spät (mehr als 4-5 Tage nach der Verletzung) auf..

Es gibt zwei Hauptgründe für die Entwicklung einer frühen Sekundärblutung:

• Abrutschen des Gefäßes der Ligatur, die beim Stoppen der Primärblutung auferlegt wurde;

• Auswaschen eines Blutgerinnsels aus einem Gefäß aufgrund eines Anstiegs des systemischen Drucks und eines beschleunigten Blutflusses oder aufgrund einer Abnahme der spastischen Kontraktion eines Gefäßes, die während eines akuten Blutverlusts auftritt.

Spätsekundäre oder arrosive Blutungen sind mit der Zerstörung der Gefäßwand infolge der Entwicklung eines Infektionsprozesses in der Wunde verbunden. Solche Fälle sind einer der schwierigsten, da die gesamte Gefäßwand in diesem Bereich verändert wurde und ein Rückfall von Blutungen jederzeit möglich ist..

Alle Blutungen können akut oder chronisch sein. Bei akuten Blutungen tritt die Blutung in kurzer Zeit auf, und bei chronischen Blutungen tritt sie allmählich auf, in kleinen Portionen werden manchmal unbedeutende, periodische Blutungen über viele Tage beobachtet. Chronische Blutungen können bei Magen- und Zwölffingerdarmgeschwüren, bösartigen Tumoren, Hämorrhoiden, Uterusmyomen usw. auftreten..

Veränderungen im Körper bei akutem Blutverlust. Arten von Blutungen je nach Zeitpunkt ihres Auftretens. Prävention von späten Sekundärblutungen.

Veränderungen im Körper bei akutem Blutverlust

Venen sind der kapazitive Hauptteil des Gefäßbettes, sie enthalten 70-75% des BCC. Der mit dem Blutverlust entstehende venomotorische Effekt (erhöhter Venentonus) gleicht den Verlust von bis zu 10-15% des BCC aus.

Aufgrund von Hypovolämie sowie aufgrund des sich anschließend entwickelnden Symptoms eines niedrigen Herzzeitvolumens und eines Krampfes der Arteriolen nimmt der hydrostatische Druck in den Kapillaren ab, was zum Durchgang der interzellulären Flüssigkeit in diese führt. Ein solcher Mechanismus in den ersten 5 Minuten mit Blutverlust kann einen Zufluss von bis zu 10-15% des BCC in die Gefäße bewirken..

Die Entwicklung einer Hypovolämie führt zu einer Abnahme des venösen Flusses zum Herzen und dementsprechend des Herzzeitvolumens. Wenn Sie für eine bestimmte Zeit eine Tachykardie entwickeln, die mit der Wirkung des Sympatho-Nebennieren-Systems verbunden ist, können Sie das Herzzeitvolumen auf einem normalen Niveau halten.

Bei Hypovolämie wird die Sekretion des Hypophysen-Antidiuretikums und des Aldosterons stimuliert. Dies führt zu einer Zunahme der Wasserresorption, der Retention von Natrium- und Chlorionen und der Entwicklung von Oligurie.

Die adaptive Hyperventilation zielt zunächst darauf ab, die Saugwirkung der Brust zu erhöhen und den Blutfluss zum Herzen kompensatorisch zu erhöhen. Dann ist seine Entwicklung weitgehend mit metabolischen Veränderungen in Organen und Geweben und einer Verletzung des Säure-Base-Gleichgewichts verbunden..

Der periphere arterielle Krampf ist ein Übergangsstadium zwischen kompensatorischen und pathologischen Reaktionen beim Blutverlust, dem wichtigsten Mechanismus zur Aufrechterhaltung des systemischen Blutdrucks und der Blutversorgung von Gehirn, Herz und Lunge. In den Fällen, in denen diese Kompensationsmechanismen ausreichen, um ein normales BCC aufrechtzuerhalten und Blutungen zu stoppen, normalisiert sich der Zustand aller Organe und Systeme allmählich. Wenn das Volumen des Blutverlusts die Kompensationsfähigkeiten des Körpers überschreitet, tritt ein Komplex von pathologischen Störungen auf..

Zum Zeitpunkt des Auftretens der Blutung kann primär und sekundär sein.

Das Auftreten einer primären Blutung ist mit einer direkten Schädigung des Gefäßes während eines Traumas verbunden. Es manifestiert sich sofort oder in den ersten Stunden nach dem Schaden.

Sekundärblutungen treten früh (normalerweise mehrere Stunden bis 4-5 Tage nach der Verletzung) und spät (mehr als 4-5 Tage nach der Verletzung) auf..

Es gibt zwei Hauptgründe für die Entwicklung einer frühen Sekundärblutung:

• Abrutschen des Gefäßes der Ligatur, die beim Stoppen der Primärblutung auferlegt wurde;

• Auswaschen eines Blutgerinnsels aus einem Gefäß aufgrund eines Anstiegs des systemischen Drucks und eines beschleunigten Blutflusses oder aufgrund einer Abnahme der spastischen Kontraktion eines Gefäßes, die während eines akuten Blutverlusts auftritt.

Spätsekundäre oder arrosive Blutungen sind mit der Zerstörung der Gefäßwand infolge der Entwicklung eines Infektionsprozesses in der Wunde verbunden. Solche Fälle sind einer der schwierigsten, da die gesamte Gefäßwand in diesem Bereich verändert wurde und ein Rückfall von Blutungen jederzeit möglich ist..

Die folgenden Hauptpunkte werden verwendet, um sekundäre Blutungen zu verhindern..

1. Gründliches endgültiges Stoppen der Primärblutung bei Beschädigung der Blutgefäße und während eines chirurgischen Eingriffs. Vor dem Nähen der Wunde muss der Bereich des chirurgischen Eingriffs sorgfältig untersucht werden (Überprüfung der Blutstillung). Wenn kein Vertrauen in den vollständigen Stopp der Blutung besteht, werden zusätzliche Techniken durchgeführt - Ligation, Elektrokoagulation des Gefäßes, Verwendung eines hämostatischen Schwamms. Erst bei vollständiger Blutstillung endet die Operation mit Wundnähten.

2. Gründliche Durchführung der primären chirurgischen Behandlung von Wunden, Entfernung von Fremdkörpern - frei liegende Knochenfragmente, Metallfremdkörper (Fragmente von Muscheln, Kugeln, Schüssen usw.).

3. Prävention eitriger Wundkomplikationen: sorgfältige Einhaltung der Regeln der Asepsis und Antisepsis während der Operation, antibakterielle Therapie.

4. Entwässerung von Wunden, Hohlräumen unter Berücksichtigung der Topographie der Gefäße, um die Bildung von Druckgeschwüren ihrer Wand, Arrosion zu verhindern.

5. Untersuchung des Zustands des Blutgerinnungs- und Antikoagulationssystems des Patienten vor jeder geplanten Operation: Gerinnungszeit, Blutungszeit, Prothrombinspiegel, Thrombozytenzahl.

6. Sorgfältige Beobachtung von Patienten, die operiert wurden, um Sekundärblutungen rechtzeitig zu erkennen. Das medizinische Personal sollte sich der klinischen Anzeichen einer Sekundärblutung und des Risikos für das Leben des Patienten bewusst sein. Solche Anzeichen umfassen das Abtupfen des Verbandes mit Blut, zunehmende Schwäche, Blässe der Haut, häufiger Puls, schwache Füllung, fallender Blutdruck.

Labor- und Instrumentalmethoden zur Diagnose innerer Blutungen.

UAC: Erythrozyten, Hämoglobin, Hämatokrit

Spezielle Diagnosemethoden

Unter den speziellen Forschungsmethoden zur Diagnose von Blutungen sind die wichtigsten:

• Ultraschall, Röntgen, CT, Magnetresonanztomographie (MRT).

Es sollte beachtet werden, dass sie in Fällen verwendet werden sollten, in denen die Diagnose einer Blutung nicht klar ist oder deren Natur geklärt werden muss. Dies kann die Behandlungstaktik beeinflussen. Wenn die Diagnose klar ist und die Taktik eindeutig ist, müssen Sie dem Patienten früher helfen.

Diagnosepunktionen werden für eine Reihe latenter innerer Blutungen verwendet. Punktion der Pleurahöhle - bei Verdacht auf Hämothorax, Gelenkpunktion - bei Verdacht auf Hämarthrose, Abdominalpunktion (oder Laparozentese) - bei Verdacht auf Hämoperitoneum, Lumbalpunktion - Diagnose einer intrakraniellen Blutung und Hämatome, Punktion des hinteren Vaginalfornix - bei Verdacht auf eine Ruptur Eierstock oder Eileiter in einer Eileiterschwangerschaft. Punktionen werden auch zur Diagnose von Hämatomen in Weichteilen verwendet, die mit einer Nadel und einer Spritze durchgeführt werden. Nach dem Einführen der Nadel in den entsprechenden Hohlraum wird der Spritzenkolben zu sich selbst gezogen. Das Auftreten von Blut in der Spritze bestätigt die Diagnose einer Blutung. Im Hämoperitoneum wird anstelle einer Nadelpunktion ein dünner Drainageschlauch durch einen Trokar eingeführt (Laparocentesis), wodurch die Wahrscheinlichkeit einer Schädigung der inneren Organe verringert wird,

Endoskopische Methoden sind für die Diagnose innerer Blutungen unerlässlich. Bei Blutungen in das Lumen des Magen-Darm-Trakts wird eine Ösophagogastroduodenoskopie oder Koloskopie mit Hämaturie - Zystoskopie, Hämarthrose - Arthroskopie, Blutungen in die Bauch- oder Brusthöhle - Laparoskopie bzw. Thorakoskopie durchgeführt.

Angiographie ist eine ziemlich komplexe Studie. Es wird bei schlechtem Blutverlust, unklarer Lage und Natur angewendet.

Schäden am Schiff. Bei einem retroperitonealen Hämatom ist es also möglich, eine Aortographie durchzuführen. Es gibt eine Reihe von Blutungen, die ohne Angiographie sehr schwer zu diagnostizieren sind (z. B. Blutungen aus einem Aneurysma der Arterien der Magenwand oder des Zwölffingerdarms in ihr Lumen)..

Ultraschall, Röntgen, CT, MRT. Alle diese Methoden ermöglichen es, die Lokalisation von Blutungen und das Ausmaß des Blutverlusts zu bestimmen. Mit Hämothorax kann die Diagnose also durch einfache Radiographie mit Hämoperitoneum gestellt werden - durch Ultraschall der Bauchorgane werden Hämatome und Blutungen in der Schädelhöhle mit Echolokalisierung, CT und MRT gut diagnostiziert.

Möglichkeiten, Blutungen vorübergehend zu stoppen. Regeln zum Auferlegen von Gurten.

Maximale Beugung der Extremität

Die Methode ist wirksam bei Blutungen aus den Gefäßen des Oberschenkels (maximale Beugung im Hüftgelenk), des Unterschenkels und des Fußes (maximale Beugung im Kniegelenk), der Hand und des Unterarms (maximale Beugung im Ellbogengelenk) (Abb. 5-6)..

Die maximale Beugung der Extremität wird sowohl für arterielle Blutungen als auch für massive Blutungen aus Wunden der Extremitäten verwendet. Die Methode ist weniger zuverlässig als die Verwendung eines Tourniquets (siehe unten), aber gleichzeitig weniger traumatisch. Die maximale Beugung des Ellenbogengelenks wird häufig verwendet, um Blutungen nach Punktion der Ulnarvene zu stoppen (intravenöse Infusion, Blutentnahme für Forschungszwecke)..

Erhöhte Extremitätenposition

Die Methode ist sehr einfach - es ist notwendig, das verletzte Glied anzuheben. Wird bei venösen oder kapillaren Blutungen verwendet, insbesondere bei Wunden der unteren Extremitäten.

Druckverband Indikationen

Ein Druckverband wird für mäßige Blutungen aus kleinen Gefäßen, venöse oder kapillare Blutungen verwendet. Diese Methode ist die Methode der Wahl bei Blutungen aus Krampfadern der unteren Extremitäten. Ein Druckverband kann an der Wunde angelegt werden, um Blutungen in der frühen postoperativen Phase zu verhindern (nach Phlebektomie, sektoraler Resektion der Brustdrüse, Mastektomie usw.). Um diese einfache Methode anzuwenden, benötigen Sie nur einen Verband.

Mehrere sterile Servietten werden auf die Wunde aufgebracht (manchmal wird oben eine Walze gebildet) und fest verbunden. Vor dem Anlegen eines Verbandes an einem Glied muss ihm eine erhöhte Position eingeräumt werden. Der Verband sollte von der Peripherie bis zur Mitte angelegt werden.

Fingerdruck der Arterien

Dies ist eine ziemlich einfache Methode, für die keine zusätzlichen Elemente erforderlich sind. Sein Hauptvorteil ist die schnellstmögliche Ausführung, sein Nachteil ist die Effizienz nur für 10-15 Minuten, d.h. kurze Dauer.

Die Indikation für die digitale Kompression der Arterien ist eine arterielle oder massive Blutung aus dem entsprechenden arteriellen Becken. Die Methode ist in Notsituationen wichtig, um sich auf die Anwendung einer anderen Blutstillungsmethode vorzubereiten, beispielsweise die Anwendung eines Tourniquets.

Basierend auf Materialien von studfiles.net

Plasma (Serum) -Antigene sind spezifische Komplexe von Aminosäuren oder Kohlenhydraten auf der Oberfläche von Blutplasma (Serum) -Proteinmolekülen.

Die BLUTGRUPPE ist eine Kombination aus normalen immunologischen und genetischen Eigenschaften von Blut, die erblich bestimmt ist und eine biologische Eigenschaft jedes Einzelnen darstellt.

Blutgruppen werden vererbt, bilden sich nach 3-4 Monaten intrauteriner Entwicklung und bleiben während des gesamten Lebens unverändert. Es wird angenommen, dass die Blutgruppe beim Menschen mehrere Dutzend Antigene in verschiedenen Kombinationen enthält. Diese Kombinationen - Blutgruppen - können tatsächlich mehrere Milliarden betragen. Sie sind praktisch nur bei identischen Zwillingen mit demselben Genotyp gleich..

In der praktischen Medizin spiegelt der Begriff "Blutgruppe" in der Regel die Kombination von Erythrozytenantigenen des ABO-Systems und des Rh-Faktors und den entsprechenden Antikörpern im Blutserum wider.

Für jedes bekannte Antigen wurden gleichnamige Antikörper (Anti-A, Anti-B, Anti-Rhesus, Anti-Kell usw.) gefunden. Gruppenantikörper von Blut sind keine so konstante Eigenschaft des menschlichen Körpers wie Antigene. Nur im ABO-Gruppensystem sind Antikörper eine normale angeborene Eigenschaft von Blutplasma. Diese Antikörper (Agglutinine a und b) sind im menschlichen Blutplasma ständig vorhanden..

Der Begriff "Kompatibilität" bedeutet eine Kombination von Spender- und Empfängerblut für Antigene und Antikörper, die keine immunologischen Wechselwirkungen verursacht.

Abhängig vom Vorhandensein der Agglutinogene A und B in Erythrozyten und im Serum der entsprechenden Agglutinine a und b werden alle Personen in vier Gruppen eingeteilt:

• Gruppe O (I) - Es gibt keine Agglutinogene in Erythrozyten, Agglutinine a und b im Serum.

• Gruppe A (II) - Agglutinogen A in Erythrozyten, Agglutinin B im Serum.

• Gruppe B (III) - Agglutinogen B in Erythrozyten, Agglutinin a im Serum.

• Gruppe AB (IV) - Agglutinogene A und B in Erythrozyten, keine Agglutinine im Serum.

Antigen A ist nicht homogen, es gibt zwei Hauptuntertypen: Dementsprechend hat Gruppe A (II) zwei Untergruppen A (P) und A.2 (II) und die AB (IV) -Gruppe - AB (IV) und A.2B (IV).

Antigen der Gruppe B ist homogener, obwohl seltene Varianten beschrieben wurden. Dies hat jedoch keine signifikante klinische Bedeutung..

Die Blutzugehörigkeit nach dem ABO-System wird anhand der Agglutinationsreaktion bestimmt. Derzeit werden drei Methoden verwendet, um Blutgruppen nach dem ABO-System zu bestimmen:

• gemäß Standard-Isohämagglutinierungsseren,

• gemäß Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten (Kreuzmethode),

• Verwendung monoklonaler Antikörper (Anti-A- und Aiti-B-Tsoliclone).

Während einer Routineuntersuchung bestimmt der Krankenhausarzt die Blutgruppe unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren oder unter Verwendung von Tsoliclonen. Anschließend sendet er das Blut an ein serologisches Labor, um die Gruppe mit einer Kreuzmethode zu überprüfen.

Die Blutgruppe gilt erst dann als bestimmt, wenn das Labor die vom Krankenhausarzt erhaltenen Daten bestätigt hat. Wenn sich die Forschungsergebnisse voneinander unterscheiden, sollten beide Studien wiederholt werden..

Im Notfall (bei Blutungen ist eine dringende Bluttransfusion erforderlich) bestimmt der Krankenhausarzt die Gruppe selbst (im Labor wird eine erneute Überprüfung durchgeführt, jedoch nachträglich)..

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH STANDARD-ISOGEMAGLUTINIERUNGSSERUM

Am häufigsten in der klinischen und Laborpraxis.

Die Essenz des Verfahrens besteht darin, Antigene der Gruppen A und B im getesteten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren nachzuweisen. Wird in einem Raum mit guter Beleuchtung bei einer Temperatur von 15-25 ° C durchgeführt.

• Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen O (I), A (II), B (III) und AB (IV) in zwei verschiedenen Reihen. Das Serum sollte transparent sein und keine Anzeichen von Zerfall aufweisen. Der Einfachheit halber werden Standard-Hämagglutinierungsseren verschiedener Gruppen in einer bestimmten Farbe getönt: O (I) - farblos (grau), A (II) - blau, B (III) - rot, AB (IV) - hellgelb. Es ist zu beachten, dass diese Farben allen Etiketten auf Blutprodukten mit Gruppenzugehörigkeit (Blut, Erythrozytenmasse, Plasma usw.) beigefügt sind..

• Weiße Porzellan- oder Emailplatten oder jede andere Platte mit einer benetzten Oberfläche, gekennzeichnet mit 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

• Isotonische Natriumchloridlösung.

• Nadeln, Pipetten, Glasstäbe (Objektträger).

b) Technik der Reaktion

1. Auf eine Platte (Platte) Standard-Isohämagglutinierungsseren der Gruppen I, II, III in einem Volumen von 0,1 ml (ein großer Tropfen mit einem Durchmesser von etwa 1 cm) auftragen. Um Fehler zu vermeiden, werden zwei Serenchargen aus jeder Gruppe angewendet. Insgesamt 6 Tropfen.

2. Sechs Tropfen Testblut, ungefähr so ​​groß wie ein Stecknadelkopf, 0,01 ml (kleiner Tropfen), werden nacheinander mit einem trockenen Glasstab an 6 Stellen neben einem Tropfen Standardserum auf eine Platte übertragen (die Menge an Testblut sollte ungefähr zehnmal geringer sein als die Menge an Standardserum ), dann mischen Sie sie vorsichtig mit Glasstäben mit abgerundeten Kanten.

3. Nach dem Mischen wird die Platte regelmäßig geschaukelt..

Die Agglutination beginnt innerhalb der ersten 10 bis 30 Sekunden.

4. In den Tropfen, in denen eine Agglutination aufgetreten ist, einen Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugeben, wonach das Ergebnis der Reaktion bewertet wird.

Bei einer positiven Reaktion, normalerweise innerhalb der ersten 10 bis 30 Sekunden, erscheinen kleine rote Körner (Agglutinate), die aus geklebten roten Blutkörperchen bestehen und mit bloßem Auge sichtbar sind, in der Mischung.

Wenn die Seren aller drei Gruppen positiv sind, bedeutet dies, dass das Testblut beide Agglutinogene - A und B - enthält und zur Gruppe AB (IV) gehört. In solchen Fällen ist es jedoch erforderlich, eine zusätzliche Kontrollstudie des getesteten Blutes mit Standard-Isohämagglutinierungsserum der Gruppe AB (IV) durchzuführen, das keine Agglutinine enthält, um eine unspezifische Agglutinationsreaktion (Kaltagglutination, Pangglutination, Allergie) auszuschließen. Nur das Fehlen einer Agglutination in diesem Tropfen in Gegenwart einer Agglutination in Tropfen, die Standardseren der Gruppen 0 (1), A (II) und B (III) enthalten, ermöglicht es uns, die Reaktion als spezifisch zu betrachten und das untersuchte Blut an Gruppe AB zu verweisen0 (Iv).

Es ist zu beachten, dass in Gegenwart eines schwachen Subtyps von Antigen A im untersuchten Blut die Agglutinationsreaktion mit hämagglutinierenden Seren der Gruppen 0 (1) und B (III) später (nach 3-4 Minuten) beginnt. Um den Subtyp von Antigen A genau zu bestimmen, ist es notwendig, eine zusätzliche Reaktion mit dem sogenannten Anti-A-Reagenz durchzuführen.

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH STANDARD-ISOGEMAGLUTINIERUNG VON SERUM- UND STANDARD-ERYTHROZYTEN (KREUZMETHODE)

Die Methode wird am häufigsten in serologischen Labors angewendet. Das Wesentliche des Verfahrens besteht darin, das Vorhandensein oder Fehlen von Gruppenantigenen A und B im untersuchten Blut unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren sowie von Gruppenantikörpern a und b unter Verwendung von Standard-Erythrozyten zu bestimmen.

• Die Ausrüstung für die Reaktion mit Standard-Erythrozyten unterscheidet sich darin, dass für die Agglutinationsreaktion Standard-Erythrozyten mit drei Blutgruppen erforderlich sind: 0 (1), A (II), B (III).

• Standard-Erythrozyten werden aus dem Blut von Spendern mit einer zuvor bekannten Blutgruppe hergestellt und bei 4-8 ° C gelagert.

Auf eine markierte Platte mit einer Pipette in sechs Zellen wird ein großer Tropfen Serum des Testbluts aus einem Reagenzglas (0,1 ml) aufgetragen und daneben ein kleiner Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten der Gruppen 0 (1), A (P), H (W) (zwei Reihen).

Ein Merkmal der Interpretation der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Erythrozyten ist, dass die Erythrozyten der Gruppe 0 (1) Kontrolle sind (sie enthalten keine Antigene, was eine spezifische Agglutinationsreaktion mit irgendeinem Serum grundsätzlich unmöglich macht)..

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPEN DURCH MONOKLONALE ANTIKÖRPER

Zur Bestimmung der Blutgruppe werden monoklonale Antikörper verwendet, für die die Hybridom-Biotechnologie verwendet wird.

Ein Hybridom ist ein Zellhybrid, der durch Fusion einer Knochenmarktumorzelle (Myelom) mit einem Immunlymphozyten gebildet wird, der spezifische monoklonale Antikörper synthetisiert. Das Hybridom erhält die Eigenschaften beider "Eltern": die Fähigkeit zu unbegrenztem Wachstum, die für eine Tumorzelle charakteristisch ist, und die Fähigkeit, Antikörper zu synthetisieren, die einem Immunlymphozyten innewohnen.

Es wurden Standardreagenzien entwickelt - monoklonale Antikörper (MCA): Anti-A- und Anti-B-Tsoliclone, die zur Bestimmung von Erythrozytenagglutinogenen verwendet werden. Zyklone sind lyophilisierte Pulver roter (Anti-A) oder blauer (Anti-B) Farbe, die unmittelbar vor der Untersuchung mit isotonischer Natriumchloridlösung verdünnt werden.

Die Zyklone Anti-A und Anti-B werden in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Etiketten auf eine weiße Platte aufgetragen: Anti-A oder Anti-B. Ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Testbluts wird neben die Tropfen der Antikörper aufgetragen. Nach dem Mischen der Komponenten wird die Agglutinationsreaktion 2-3 Minuten lang überwacht..

1940 entdeckten K. Landsteiner und A. S. Wiener ein völlig neues Antigen in menschlichen Erythrozyten, das sie Rh-Faktor (Rh) nannten. Der Rh-Faktor ist bei 85% der Menschen im Blut vorhanden, und 15% der Menschen enthalten diesen Faktor nicht. So ist es nach dem Rhesusaffen benannt, der es immer hat.

Rhesusantigene werden als Lipoproteine ​​klassifiziert. Sie sind sehr aktiv und in der Lage, die Bildung von Immunantikörpern zu induzieren.

Das Vorhandensein des Rh-Antigens wird in einem menschlichen Fötus ab 5-8 Wochen nachgewiesen und in einem 3-4 Monate alten Embryo gut exprimiert.